05版藥典微生物限度檢查法操作要點-資料下載頁
2025-04-04 23:00本頁面
【正文】 品0．01g或0．0lml)、1：1000的供試液lml(含供試品0．001g或0．001m1)，另取1支膽鹽乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基管加入稀釋液lml作為陰性對照管。培養(yǎng)18～24小時。 膽鹽乳糖發(fā)酵管若無菌生長、或有菌生長但不產(chǎn)酸產(chǎn)氣，判該管未檢出大腸菌群；若產(chǎn)酸產(chǎn)氣，應(yīng)將發(fā)酵管中的培養(yǎng)物分別劃線接種于曙紅亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基或麥康凱瓊脂培養(yǎng)基的平板上，培養(yǎng)18～24小時。若平板上無菌落生長，或生長的菌落與表2所列的菌落形態(tài)特征不符或為非革蘭陰性無芽孢桿菌，判該管未檢出大腸菌群；若平板上生長的菌落與表2所列的菌落形態(tài)特征相符或疑似，且為革蘭陰性無芽孢桿菌，應(yīng)進行確證試驗。表2 大腸菌群菌落形態(tài)特征培養(yǎng)基菌落形態(tài)曙紅亞甲藍瓊脂呈紫黑色、淺紫色、紅色或粉紅色，圓形，扁平或稍凸起，邊緣整齊，表面光滑，濕潤麥康凱瓊脂鮮桃紅色或粉紅色，圓形，扁平或稍凸起，邊緣整齊，表面光滑，濕潤 確證試驗 從上述分離平板上挑選4～5個疑似菌落，分別接種于乳糖發(fā)酵管中，培養(yǎng)24～48小時。若產(chǎn)酸產(chǎn)氣，判該膽鹽乳糖發(fā)酵管檢出大腸菌群，否則判未檢出大腸菌群。 根據(jù)大腸菌群的檢出管數(shù)，按表3報告1g或lml供試品中的大腸菌群數(shù)。表3 可能的大腸菌群數(shù)表各供試品量的檢出結(jié)果可能的大腸菌群數(shù)N (個/g或ml)++++++103102N10310N10210 注：+代表檢出大腸菌群；一代表未檢出大腸菌群。取供試液10ml(相當(dāng)于供試品1g、lml)2份，其中1份置80℃保溫10分鐘后迅速冷卻。上述2份供試液直接或處理后分別接種至100ml的新鮮庖肉培養(yǎng)基中。各培養(yǎng)基管在厭氧條件下培養(yǎng)72～96小時。如試驗管不出現(xiàn)渾濁、產(chǎn)氣、消化碎肉、臭氣等現(xiàn)象，判供試品未檢出梭菌；否則，涂抹接種于含慶大霉素的哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基平板上，在厭氧條件下培養(yǎng)48～72小時。若平板上無菌落生長，判供試品未檢出梭菌；若平板上有菌落生長，應(yīng)挑選2～3個菌落分別進行革蘭染色和過氧化氫酶試驗。 過氧化氫酶試驗 取上述平板上的菌落，置潔凈玻片上，滴加3％過氧化氫試液，若菌落表面有氣泡產(chǎn)生，為過氧化氫酶試驗陽性，否則為陰性。若上述可疑菌落為革蘭陽性梭菌，有或無卵圓形或球形的芽孢，過氧化氫酶陰性，判供試品檢出梭菌，否則判供試品未檢出梭菌。結(jié)果判斷 供試品檢出控制菌或其他致病菌時，按一次檢出結(jié)果為準(zhǔn)，不再復(fù)試。 供試品的細菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)其中任何一項不符合該品種項下的規(guī)定，應(yīng)從同一批樣品中隨機抽樣，獨立復(fù)試兩次，以3次結(jié)果的平均值報告菌數(shù)。 眼用制劑檢出霉菌和酵母菌數(shù)時，須以兩次復(fù)試結(jié)果均不得長菌，方可判供試品的霉菌和酵母菌數(shù)符合該品種項下的規(guī)定。若供試品的細菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)及控制菌三項檢驗結(jié)果均符合該品種項下的規(guī)定，判供試品符合規(guī)定；若其中任何一項不符合該品種項下的規(guī)定，判供試品不符合規(guī)定。8 /
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