酶enzymppt課件(編輯修改稿)
2025-02-04 05:51 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 究一種因素的影響時，其余各因素均恒定。 目錄 、 單產(chǎn)物反應(yīng)； ， 用單位時間內(nèi)底物的消耗量和產(chǎn)物的生成量來表示； ， 即底物的消耗量很小 （ 一般在5﹪ 以內(nèi) ） 時的反應(yīng)速率 。 ? 在其他因素不變的情況下，底物濃度對反應(yīng)速度的影響呈 矩形雙曲線關(guān)系 。 一、底物濃度對酶促反應(yīng)速度的影響 研究前提 目錄 當(dāng)?shù)孜餄舛容^低時 反應(yīng)速度與底物濃度成正比；反應(yīng)為一級反應(yīng)。 [S] V Vmax 目 錄 目錄 隨著底物濃度的增高 反應(yīng)速度不再成正比例加速；反應(yīng)為混合級反應(yīng)。 [S] V Vmax 目 錄 目錄 當(dāng)?shù)孜餄舛雀哌_(dá)一定程度 反應(yīng)速度不再增加，達(dá)最大速度；反應(yīng)為零級反應(yīng) [S] V Vmax 目 錄 目錄 中間產(chǎn)物 ?酶促反應(yīng)模式 中間產(chǎn)物學(xué)說： E + S k1 k2 k3 ES E + P （一）米－曼氏方程式 目錄 ?1913年 Michaelis和 Menten提出反應(yīng)速率與底物濃度關(guān)系的數(shù)學(xué)方程式 ， 即米－曼氏方程式 ， 簡稱米氏方程式 (Michaelis equation)。 [S] ：底物濃度 V ：不同 [S]時的反應(yīng)速率 Vmax：最大反應(yīng)速率 (maximum velocity) Ｋ m ：米氏常數(shù) (Michaelis constant) Ｖ Vmax[S] Km + [S] ＝ ── 目錄 1. E與 S形成 ES復(fù)合物的反應(yīng)是快速平衡反應(yīng) ，而 ES分解為 E及 P的反應(yīng)為慢反應(yīng) ， 反應(yīng)速率取決于慢反應(yīng)即 V = k3[ES]。 (1) 2. S的總濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于 E的總濃度 ， 因此在反應(yīng)的初始階段 ， S的濃度可認(rèn)為不變即 [S] =[St]。 ?米－曼氏方程式推導(dǎo)基于兩個假設(shè)： 目錄 ? 米－曼氏方程式推導(dǎo)過程： 穩(wěn)態(tài) ： ES的生成速率 = ES的分解速率 k2+k3 = Km （米氏常數(shù)） k1 令： 則 (2)變?yōu)?: ([Et]－ [ES]) [S] = Km [ES] (2) = ([Et]－ [ES])[S] k2+k3 [ES] k1 整理得： k1 ([Et]－ [ES]) [S] = k2 [ES] + k3 [ES] 目錄 當(dāng)?shù)孜餄舛群芨?，將酶的活性中心全部飽和時，即 [Et] =[ES]， 反應(yīng)達(dá)最大速率 Vmax = k3[ES] = k3[Et] (5) [ES] = ─── [Et][S] Km + [S] (3) 整理得 : 將 (5)代入 (4)得米氏方程式： Vmax [S] Km + [S] V = ──── 將 (3)代入 (1) 得 k3[Et][S] Km + [S] (4) V = ──── 目錄 （二） Km與 Vm是有意義的酶促反應(yīng)動力學(xué)參數(shù) ? Km值的推導(dǎo) ? Km與 Vmax的意義 目錄 當(dāng)反應(yīng)速率為最大反應(yīng)速率一半時： ? Km值的推導(dǎo) Km = [S] ?Km值等于酶促反應(yīng)速率為最大反應(yīng)速率一半時的底物濃度，單位是 mol/L。 2 = Km + [S] Vmax Vmax[S] Vmax V [S] Km Vmax/2 目錄 ? Km與 Vmax的意義 ? 定義： Km等于酶促反應(yīng)速率為最大反應(yīng)速率一半時的底物濃度。 ? 意義： 1. Km是酶的特征性常數(shù)之一，只與酶的結(jié)構(gòu)、底物和反應(yīng)環(huán)境（如，溫度、 pH、離子強度）有關(guān)，與酶的濃度無關(guān)。 2. Km可近似表示酶對底物的親和力； 3. 同一酶對于不同底物有不同的 Km值。 Km值 目錄 Vmax ?意義 ： Vmax=k3 [E] ?定義 ： Vm是酶完全被底物飽和時的反應(yīng)速率，與酶濃度成正比。 如果酶的總濃度已知，可從 Vmax計算酶的轉(zhuǎn)換數(shù) (turnover number)，即動力學(xué)常數(shù) k3。 目錄 1. 雙倒數(shù)作圖法 (double reciprocal plot)，又稱為 林 貝氏 (Lineweaver Burk)作圖法 Vmax[S] Km+[S] V = （林－貝氏方程） + 1/V= Km Vmax 1/Vmax 1/[S] 兩邊同取倒數(shù) （三）Ｋ m值與Ｖ max值可以通過作圖法求取 1/[S] 1/V 1/Km 1/Vmax 斜率 Km/Vm 目錄 2. Hanes作圖法 在林－貝氏方程基礎(chǔ)上，兩邊同乘 [S] [S]/V=Km/Vmax + [S]/Vmax [S] [S]/V Km Km/Vm 1/Vmax 目錄 二、底物足夠時酶濃度對反應(yīng)速率的影響呈直線關(guān)系 ?在酶促反應(yīng)系統(tǒng)中，當(dāng)?shù)孜餄舛却蟠蟪^酶的濃度，酶被底物飽和時，反應(yīng)速率達(dá)最大速率。此時，反應(yīng)速率和酶濃度變化呈正比關(guān)系。 目錄 ?當(dāng) [S]＞＞ [E]，酶可被
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