酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)技術(shù)研究-資料下載頁(yè)
2025-01-06 09:41本頁(yè)面
【正文】 60 s。通過(guò)不同草甘膦底物的濃度 [S]下 GAT催化轉(zhuǎn)乙酰反應(yīng)的反應(yīng)速率 v,以 1/[S]為橫坐標(biāo) 1/v為縱坐標(biāo) ,LineweaverBurk法雙倒數(shù)作圖 ,求出米氏常數(shù) KM和最大速率vmax,而催化常數(shù) kcat=vmax/[E],[E]為酶濃度。具體測(cè)定方法參照文獻(xiàn) [23]。 GAT酶的活性用催化效率 kcat/KM表示。數(shù)據(jù)處理軟件為 GraphPad Prism。 舉例 2:磁場(chǎng)和抑制劑對(duì)蓮藕多酚氧化酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)的影響 ? 通過(guò)添加 Vc和外加磁場(chǎng)處理 ,研究蓮藕多酚氧化酶 (PPO)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)的變化規(guī)律。以鄰苯二酚為底物 ,蓮藕 PPO褐變反應(yīng)動(dòng)力學(xué)符合米氏方程所描述的單底物酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué),Km為 0775 mol/L,Vmax為 11150 U/min。 Vc對(duì) PPO有較強(qiáng)的抑制作用 ,反應(yīng)動(dòng)力學(xué)參數(shù) Km為 0081 mol/L,Vmax為3243 U/min,呈現(xiàn)反競(jìng)爭(zhēng)性抑制 ,表現(xiàn)為褐變出現(xiàn)滯后 ,隨 Vc濃度的增大滯后時(shí)間逐漸增長(zhǎng) ,且呈現(xiàn) S型趨勢(shì) ,并建立了相應(yīng)的反應(yīng)方程。不同磁場(chǎng)強(qiáng)度下 ,隨著處理時(shí)間的變化,PPO活性呈現(xiàn)波動(dòng)性。 317 A/m磁場(chǎng)強(qiáng)度下處理 4 h的酶液其反應(yīng)動(dòng)力學(xué)曲線表現(xiàn)為 S型 ,并建立了相應(yīng)的反應(yīng)方程。 敬請(qǐng)期待，下期更精彩
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