質粒dna的提取酶切及濃度檢測(編輯修改稿)
2025-06-22 18:28 本頁面
【文章內容簡介】 四、所有步驟必須在室溫下操作。 實驗操作步驟 ? 增殖細菌、擴增質粒 ? 裂解菌體、獲取質粒 ? 抽提質粒、分離純化 ? 結果鑒定 對于未經酶切的質粒來說 ， 常會出現兩條電泳帶 1） （ 松弛 ） 螺旋狀質粒 DNA帶 2） 超螺旋狀質粒 DNA的帶 以超螺旋狀質粒 DNA居多 ， 移動速度也最快 。 有時還會出現三條帶 ， 其中一條是因為有一些質粒 DNA在提取過程中遭到損傷而線性化 ， 其移動速度介于螺旋狀和超螺旋狀質粒 DNA之間 。 如果提取的質粒很好時 ， 這條帶會很弱 ， 有時看不到 。 質粒 DNA提取范例： 質粒 DNA的酶切鑒定 1. 實驗目的和要求 學習和掌握限制性內切酶的特性、酶解操作方法，并理解限制性內切酶是DNA重組技術的關鍵工具。 2. 相關基礎知識 限制性核酸內切酶：是一類能識別雙鏈 DNA分子特異性核酸序列的 DNA水解酶 。 是體外剪切基因片段的重要工具 ， 所以常常與核酸聚合酶 、 連接酶以及末端修飾酶等一起稱為工具酶 。限制性核酸內切酶不僅是 DNA重組中重要的工具 ， 而且還可以用于基因組酶切圖譜的鑒定 。 1)限制性核酸內切酶的類型及特性 按限制酶的組成、與修飾酶活性關系以及切斷核酸的情況不同，分為三類： Ⅰ 型 Ⅱ 型 * Ⅲ 型 II型 限制性內切酶 能識別專一
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