菜花、肝臟dna的提取及瓊脂糖凝膠檢測(編輯修改稿)
2024-11-03 11:05 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 含脂高的樣品需要做 減少物理因素對 DNA的降解 。 動作輕柔緩慢 ， 盡可能不要劇烈振蕩或攪拌 ， 除破碎細胞 ， 使 DNA和蛋白分開時 60－ 70℃ 水浴外 ， 其余操作盡可能在冰浴上進行 。用槍吸核酸時最好用 1ml的槍和槍頭 ， 槍頭必要時可用剪刀剪去一段 ， 防止槍頭對 DNA造成機械損傷 。 加蛋白水解酶 ：如提動物組織中的 DNA， 常加蛋白酶 K 三 .實驗試劑 1， 5mol/L NaC溶液 。 2， 。 3， 25% SDS 溶液； 4， 24:1 氯仿－異戊醇混合液； 5， 3mol/L 乙酸鈉－ ； 6， 95%乙醇； 7， 10 X TBE。 8， EB（溴乙啶） 。 9，溴酚藍指示劑 四 . 實驗步驟 （一） DNA提取 ? 1，稱取 肝臟或者菜花 5g,用水清洗后，加入石英砂 (半匙 )研磨 ,再加入 14ml EDTA溶液，繼續(xù)研磨至漿狀，分裝兩管，平衡后對角線放入離心機， 4000 rpm離心10 min，所得沉淀即為核糖核酸粗制品． ? 2，上述沉淀物加入 EDTA溶液６ ml，再加入 25% SDS ml（分開兩管）， 60℃ 保溫 1
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