dna的粗提取與鑒定(編輯修改稿)
2025-04-18 00:26 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 有 DNA濾液中的雜質(zhì)； 用高鹽濃度的溶液溶解 DNA，能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì)；用低鹽濃度使 DNA析出，能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。 因此，通過反復(fù)溶解與析出 DNA，就能夠除去與 DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。 DNA 在上述濾過的溶液中，加入冷卻的、體積分?jǐn)?shù)為 95%的酒精溶液 50 mL，并用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，溶液中會(huì)出現(xiàn)含雜質(zhì)較少的絲狀物。用玻璃棒將絲狀物卷起，并用濾紙吸取上面的水分。這種絲狀物的主要成分就是 DNA。 思考題：這一步驟的目的是什么？為什么加入的酒精需要冷卻的？ 答案：去除溶于酒精的雜質(zhì)； 可抑制核酸水解酶的活性，防止降解 DNA；降低分子的運(yùn)動(dòng)，易于形成沉淀析出；低溫有利于增加 DNA分子柔韌性，減少斷裂。 因此， 使用冷卻的酒精，對(duì) DNA的凝集效果較佳。 8. DNA的鑒定 ? 取兩支 20 mL的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為 mol/L的氯化鈉溶液 5 mL，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解。然后，向兩支試管中各加入 4 mL的二苯胺試劑?；旌暇鶆蚝螅瑢⒃嚬苤糜诜兴屑訜?5 min，待試管冷卻后，觀察并且比較兩支試管中溶液顏色的變化。 思考題：為什么要設(shè)置對(duì)照組？實(shí)驗(yàn)中能觀察到什么現(xiàn)象？ 答案：確定二苯胺不與氯化鈉發(fā)生顏色反應(yīng)； 實(shí)驗(yàn)組試管中可看到溶液變藍(lán)色。 ? 【 例 l】 下圖為“ DNA的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)示意圖，其正確的操作順序是 ? 解析 DNA位于雞血細(xì)胞的細(xì)胞核中。采用加蒸餾水并且攪拌的方法，可使雞血細(xì)胞大量吸水脹破，細(xì)胞膜、核膜破壞，攪拌的機(jī)械作用更加速了細(xì)胞的破裂．釋放出的核物質(zhì)其實(shí)是 DNA、 RNA和蛋白質(zhì)的混合物。在濃度較高的氯化鈉溶液中核蛋白質(zhì)容易解聚， DNA的溶解度也很高，經(jīng)過濾便分離出含少量雜質(zhì)的DNA。根據(jù) DNA在冷卻的 95％的酒精中凝集反應(yīng)強(qiáng)烈的性質(zhì)，進(jìn)一步純化 DNA。將 DNA溶解于較高濃度的氯化鈉溶液中，加入冷卻的 95％的酒精溶液，可使 DNA沉淀、濃縮，形成含雜質(zhì)較少的 DNA絲狀物。 答案 :D ? 1次加酒精 :第 7步析出含雜質(zhì)較少的 DNA ? 2次加蒸餾水：第 1步（血細(xì)胞脹破） ? 第 3步（稀釋氯化鈉溶液
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