酶活力及酶ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-01 20:18 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 敵敵畏 敵百蟲 薩林 有機(jī)砷化合物：與酶的巰基結(jié)合而抑制活性 路易斯毒氣 （二）可逆抑制作用 (reversible inhibition) E+I EI 抑制劑與酶蛋白以 非共價(jià)方式結(jié)合 ，引起酶活性暫時(shí)性喪失。抑制劑 可以通過透析等方法被除去 ，并且能部分或全部恢復(fù)酶的活性。 二、酶動(dòng)力學(xué) ? 單底物酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué) 1913年，德國化學(xué)家 Michaelis和 Menten根據(jù) 中間產(chǎn)物學(xué)說 對酶促反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)進(jìn)行研究，推導(dǎo)出了表示整個(gè)反應(yīng)中底物濃度和反應(yīng)速度關(guān)系的著名公式，稱為 米氏方程 。 V=V m a x [ S ]K m + [ S ] 根據(jù)中間產(chǎn)物學(xué)說，酶促反應(yīng)分兩步進(jìn)行 : ? 米氏方程的推導(dǎo)： 米氏方程 V=V m a x [ S ]K m + [ S ]?當(dāng)反應(yīng)速度等于最大速度一半時(shí) ,即 V = 1/2 Vmax, Km = [S] ?上式表示 ,米氏常數(shù)是反應(yīng)速度為最大值的一半時(shí)的底物濃度。 ?因此 ,米氏常數(shù)的單位為mol/L。 米氏常數(shù)的意義及測定 Km — 米氏常數(shù) Vmax — 最大反應(yīng)速度 當(dāng)?shù)孜餄舛容^低時(shí) 反應(yīng)速度與底物濃度成正比；反應(yīng)為一級反應(yīng)。 [S] V Vmax 隨著底物濃度的增高 反應(yīng)速度不再成正比例加速；反應(yīng)為混合級反應(yīng)。 [S] V Vmax 當(dāng)?shù)孜餄舛雀哌_(dá)一定程度 反應(yīng)速度不再增加，達(dá)最大速度；反應(yīng)為零級反應(yīng) [S] V Vmax 米氏常數(shù) Km的意義 ? 不同的酶具有不同 Km值，它是酶的一個(gè)重要的特征物理常數(shù)。 ? Km值只是在固定的底物，一定的溫度和 pH條件下，一定的緩沖體系中測定的，不同條件下具有不同的 Km值。 ? Km值表示酶與底物之間的親和程度： Km值大表示親和程度小，酶的催化活性低 。 Km值小表示親和程度大 ,酶的催化活性高。 米氏常數(shù)的測定 基本原則 ： 將米氏方程變化成相當(dāng)于 y=ax+b的直線方程 ， 再用作圖法求出 Km。 1 Km 1 1 ??? = ?? ? ??? + ?? V Vmax [S] Vmax A. 取米氏方程式的倒數(shù)形式 ： 4 2 0 2 4 6 8 101/[S ](1/m m ol .L1)1/v1/Vmax 斜率 =Km/Vmax 1/Km ? 米氏常數(shù) Km的 測定： B、 EH法 ? 兩邊分別乘以 Km+[S]／ [S]，得 v=Kmv/［ S］ +Vmax 酶的 Km在實(shí)際應(yīng)用中的意義 ? 鑒定酶：通過測定 Km，可鑒別不同來源或相同來源但在不同發(fā)育階段，不同生理狀
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