基因工程的基本操作程序(3)-文庫(kù)吧資料
2024-09-24 20:46本頁面
【正文】 是否插入了目的基因 DNA分子雜交（ DNA和DNA之間） 是否成功顯示出雜交帶 第二步 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出 mRNA 分子雜交技術(shù)（ DNA mRNA 之間） 同上 第三步 目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì) 抗原 — 抗體雜交 同上 個(gè)體水平鑒定 包括抗蟲，抗病的 接種 實(shí)驗(yàn)，以確定是否有抗性以及抗性的程度；基因工程產(chǎn)品需要與天然產(chǎn)品的活性比較，以確定其功能是否相同等 歸納 : 基因工程的基本操作程序 1. 獲取目的基因 ? 從基因文庫(kù) ? 利用 PCR技術(shù) ? 人工合成 2. 構(gòu)建基因表達(dá)載體 ? 目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因 3. 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 ? 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、顯微注射法、 Ca2+處理微生物細(xì)胞 4. 目的基因的檢測(cè)與鑒定 ? 檢測(cè)：是否插入、轉(zhuǎn)錄、翻譯、個(gè)體水平的檢測(cè) 多細(xì)胞生物的檢測(cè)，將每個(gè)受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)并誘導(dǎo)發(fā)育成完整個(gè)體，檢測(cè)這些個(gè)體是否攝入目的基因，攝入的基因是否表達(dá)（是否表現(xiàn)出相應(yīng)的性狀）。 ? 受體細(xì)胞攝入 DNA分子后就說明目的基因完成了表達(dá)嗎？ 若不能表達(dá)，要對(duì)抗蟲基因再進(jìn)行 修飾 ?；ǚ酃芡ǖ婪ň褪窃谥参锸芊酆?，花粉形成的花粉管還未愈合前，剪去柱頭，然后，滴加 DNA（含目的基因），使目的基因借助花粉管通道進(jìn)入受體細(xì)胞。 （ 3）將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的 ______處，再加入適量 ___________，形成了一個(gè)重組 DNA分子（重組質(zhì)粒） 限制酶 黏性末端 同一種限制酶 的黏性末端 切口 DNA連接酶 相同 : ： 它們有什么作用？ a、目的基因 b、啟動(dòng)子 c、終止子 d、標(biāo)記基因 位于基因的首端 ,是mRNA結(jié)合位點(diǎn) 位于基因的末端 ,終止轉(zhuǎn)錄 檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞 （多選）一個(gè)基因表達(dá)載體的構(gòu)建應(yīng)包括 A．目的基因 B．啟動(dòng)子 C．終止子 D．標(biāo)記基因 ABCD 下列關(guān)于基因表達(dá)載體的敘述不正確的是 A．啟動(dòng)子是與 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，是起始密碼 B．啟動(dòng)子和終止子都是特殊結(jié)構(gòu)的 DNA短片段，對(duì)mRNA的轉(zhuǎn)錄起調(diào)控作用 C．標(biāo)記基因是為了鑒別受體細(xì)胞中是否有目的基因從而便于篩選 D．基因表達(dá)載體的構(gòu)建視受體細(xì)胞及導(dǎo)入方式不同而有所差別 A 目前轉(zhuǎn)基因工程可以 A. 打破地理隔離但不能突破生殖隔離 B. 打破生殖隔離但不能突破地理隔離 C. 完全突破地理隔離和生殖隔離 D. 部分突破地理隔離和生殖隔離 C 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞 （ 1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 特點(diǎn) : 能感染 雙子葉植物 和 祼子植物
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