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(自創(chuàng))基因工程的基本操作程序-文庫吧資料

2025-03-04 14:33本頁面
  

【正文】 法顯微注射技術(shù)用 Ca2+處理成感受態(tài)細(xì)胞采用基因工程的方法培育抗蟲棉,下列導(dǎo)入目的基因的作法正確的是( ?。?DNA序列,與質(zhì)粒重組,導(dǎo)入細(xì)菌,用該細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞,再進(jìn)行組織培養(yǎng) DNA序列,與質(zhì)粒重組,注射到棉的子房并進(jìn)入受精卵 DNA序列,注射到棉受精卵中四、目的基因的檢測(cè)與鑒定? 檢測(cè) :– 是否插入目的基因– 是否轉(zhuǎn)錄– 是否翻譯? 鑒定 :– 分子水平鑒定– 個(gè)體生物學(xué)水平鑒定檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的 DNA上是否插入了目的基因① 首先取出轉(zhuǎn)基因生物的 基因組 DNA;( 1)方法 : DNA分子雜交( 2)過程 :② 將含 目的基因的 DNA片段用放射性同位素等作標(biāo)記 ,以此做 探針 ;③ 使 探針 和 轉(zhuǎn)基因生物的基因組 雜交 ,若顯示出 雜交帶 ,表明染色體已插入染色體 DNA中。( 2)基因槍法適用于適用于 單子葉植物單子葉植物( 3)花粉通道法 植物花粉在柱頭上萌發(fā)后,花粉管要穿過花柱直通胚囊。基因工程技術(shù)路線(二)方法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法—— 顯微注射法—— 感受態(tài)細(xì)胞( 1)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法① 特點(diǎn): 易感染雙子葉植物和裸子植物,對(duì)大多數(shù)單子葉植物沒有感染能力② 原理: Ti質(zhì)粒上的 TDNA可以 轉(zhuǎn)移 到受體細(xì)胞,并 整合 到 受體細(xì)胞染色體 的 DNA上。 資資 料料 :復(fù)制原點(diǎn) +目的基因 +啟動(dòng)子 +終止子 +標(biāo)記基因它們各自有什么作用?步驟二:步驟二: 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 —— 核心調(diào)節(jié)基 因 操縱基 因 結(jié)構(gòu)基因RNA聚合酶半乳糖苷酶 酶 酶 聚合酶啟動(dòng)子RNA聚合酶啟動(dòng)子 : 位于基因首端的一段特殊的 DNA片斷,它是 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出 mRNA,最終獲得蛋白質(zhì)。 然后在插入抗蟲基因的質(zhì)粒中插入 啟動(dòng)子 (抗蟲基因首端 ),導(dǎo)入棉花受精卵,長成的棉花植株還是沒有抗蟲能力。蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)的氨基的氨基酸序列酸序列mR
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