12基因工程的基本操作程序-文庫吧資料
2025-03-12 12:09本頁面
【正文】 相同 (二 )基因表達(dá)載體的構(gòu)建 科學(xué)家在培育抗蟲棉時(shí)，經(jīng)過了許多復(fù)雜的過程和不懈的努力，才獲得成功。 質(zhì)粒 目的基因 限制酶 DNA連接酶 重組 DNA _________切割 質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切 口，露出 ____________。 c、延伸（ 70℃ 75℃ ）：在 TaqDNA聚合酶的作用下，從引物的 ______________________延伸，合成與模板互補(bǔ)的 ________。 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 體外 特定 DNA片段 原理： DNA復(fù)制 二、利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 四種脫氧核苷酸 (dNTP) 一對(duì)引物： 熱穩(wěn)定 DNA聚合酶 (Taq酶） 模板 DNA( 需含有目的基因 ) 條件： 一對(duì)寡核苷酸序列：與目的基因的起始段互補(bǔ) 一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物 前提： 溫度控制 IMN 變性 復(fù)性 延伸 5/ 3/ G— G T— C 3/ 5/ G— A C— C 5/ 3/ 引物 Ⅱ G— G 變性 復(fù)性 延伸 變性 (9095度 )：目的基因 DNA受熱變性，解鏈為單鏈； （ 5560）：引物與兩條單鏈通過堿基互補(bǔ)配對(duì)原則結(jié)合； （ 7075）：在 DNA聚合酶（ Taq酶）作用下，從 5′端 →3′端
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