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正文內(nèi)容

基因工程的基本操作程序-文庫吧資料

2025-01-11 17:54本頁面
  

【正文】 與 mDNA雜交 ,如果顯示出 雜交帶 , 說明目的基因 轉(zhuǎn)錄出了 mRNA。 目的基因是否 轉(zhuǎn)錄出了 mRNA 方法: 分子雜交技術(shù) 步驟: ( 1)將轉(zhuǎn)基因生物的 mRNA提取出來。 ( 2)制備一個含有目的基因的 DNA片段 ,在片 段上用 同位素標(biāo)記 , 作為探針。 檢測目的基因是否 翻譯成蛋白質(zhì) 。 四、目的基因 的檢測與鑒定 受體細(xì)胞的 DNA是否 插入了目的基因 。 導(dǎo)入方法: ( 1) 首先用 Ca2+處理細(xì)胞,使細(xì)胞處于一種能 吸 收周圍環(huán)境中 DNA分子的生理狀態(tài),這種細(xì) 胞稱為 感受態(tài)細(xì)胞 。 C、將目的基因?qū)?微生物細(xì)胞 受體: 由于 原核生物 具有繁殖快,多為單細(xì)胞,遺傳物質(zhì)相對較少等特點,因此。 ( 2)從雌性體內(nèi)取出受精卵,采用 顯微注 射儀 進行顯微注射。 轉(zhuǎn)化過程 基因槍法 原理: 利用 壓縮氣體 產(chǎn)生的動力,將包裹在金屬顆粒表面的表達(dá)載體 DNA打入受體細(xì)胞中,使目的基因與其整合并表達(dá)的方法。 注意 三、 將 目的基因 導(dǎo)入 受體 A、將目的基 因?qū)?植物細(xì)胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)換法 (最常用) 基因槍法 花粉管通道法 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)換法 農(nóng)桿菌: 是一種在土壤中生活的微生物,能在自然界感染 雙子葉植物和裸子植物 ,而對大多數(shù)單子葉植物 沒有感染能力。 ① 載體 與 表達(dá)載體 的區(qū)別:二者都有標(biāo)記基因 和復(fù)制原點兩部分 DNA片段。 終止子: 也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的 DNA片段,位于基因的末端,使 轉(zhuǎn)錄在這里終止。 (延伸) 利用 PCR技術(shù)擴增目的基因 PCR擴增儀 人工合成 目的基因 基因較小,核苷酸序列已知,可以利用 DNA合成儀人工合成 . 二、 基因 表達(dá)載體 的構(gòu)建 基因表達(dá)載體 的模式圖 抗生素 抗性 基因 將生物的所有 DNA直接
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