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正文內(nèi)容

基因工程的基本操作程序(存儲(chǔ)版)

  

【正文】 槍法 原理: 利用 壓縮氣體 產(chǎn)生的動(dòng)力,將包裹在金屬顆粒表面的表達(dá)載體 DNA打入受體細(xì)胞中,使目的基因與其整合并表達(dá)的方法。 四、目的基因 的檢測(cè)與鑒定 受體細(xì)胞的 DNA是否 插入了目的基因 。 ( 3)使 探針 與 mDNA雜交 ,如果顯示出 雜交帶 , 說(shuō)明目的基因 轉(zhuǎn)錄出了 mRNA。 答案: C 下列關(guān)于基因工程的敘述,正確的是( ) A.基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因?yàn)槟康幕? B.細(xì)菌質(zhì)粒是基因工程常用的運(yùn)載體 C.為培育成抗除草劑的作物新品種,導(dǎo)入抗除草劑基因時(shí)只能以受精卵為受體 D.通常用一種限制性?xún)?nèi)切酶處理含目的基因的DNA , 用另一種處理運(yùn)載體 DNA 解析:基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因;質(zhì)粒是基因工程常用的運(yùn)載體;通常用同一種限制酶切割目的基因和運(yùn)載體,以獲得相同的黏性末端;受體細(xì)胞可以是受精卵,也可以是體細(xì)胞。在擴(kuò)增后,通過(guò)熱變性即可使待測(cè)基因解旋成單鏈,與已知堿基序列的貧血病基因制成的 DNA探針進(jìn)行分子雜交,根據(jù)形成雙鏈的情況即可測(cè)知其堿基序列,此過(guò)程無(wú)需解旋酶,更不需要形成重組DNA分子所需的 DNA連接酶和基因轉(zhuǎn)錄所需的 RNA聚合酶。 目的基因是否 轉(zhuǎn)錄出了 mRNA 方法: 分子雜交技術(shù) 步驟: ( 1)將轉(zhuǎn)基因生物的 mRNA提取出來(lái)。 導(dǎo)入方法: ( 1) 首先用 Ca2+處理細(xì)胞,使細(xì)胞處于一種能 吸 收周?chē)h(huán)境中 DNA分子的生理狀態(tài),這種細(xì) 胞稱(chēng)為 感受態(tài)細(xì)胞 。 注意 三、 將 目的基因 導(dǎo)入 受體 A、將目的基 因?qū)?植物細(xì)胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)換法 (最常用) 基因槍法 花粉管通道法 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)換法 農(nóng)桿菌: 是一種在土壤中生活的微生物,能在自然界感染 雙子葉植物和裸子植物 ,而對(duì)大多數(shù)單子葉植物 沒(méi)有感染能力。 (DNA變性) ( 2)將溫度降至 55℃ ~60℃ ,使兩種 引物 分別與 模板 DNA的一端互補(bǔ)序列 互補(bǔ)配對(duì) 。 獲取目
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