基因工程的基本操作程序(編輯修改稿)
2025-01-25 17:54 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 因 和復制原點兩部分 DNA片段。表達載體在載 體基礎上增加了目的基因、啟動子、終止子 三部分結構 . ② 用到的工具酶： 既用到限制酶切割載體，又 用到 DNA連接酶將目的基因和載體拼接，兩 種酶作用的化學鍵都是磷酸二酯鍵 . ③ 啟動子、終止子 對于目的基因表達必不可少 . ④ 目的基因不能單獨進入受體細胞， 必需以表 達載體的方式攜帶進去。 注意 三、 將 目的基因 導入 受體 A、將目的基 因導入 植物細胞 農(nóng)桿菌轉換法 （最常用） 基因槍法 花粉管通道法 農(nóng)桿菌轉換法 農(nóng)桿菌： 是一種在土壤中生活的微生物，能在自然界感染 雙子葉植物和裸子植物 ，而對大多數(shù)單子葉植物 沒有感染能力。 原理： 當植物受到損傷時，傷口處的細胞會分泌大量的 酚類化合物 ，吸引龍桿菌移向這些細胞，這時龍桿菌的 Ti質粒 上的 TDNA（可轉移的 DNA)可轉移至 受體細胞， 并且整合到 受體細胞染色體的 DNA上 。 轉化過程 基因槍法 原理： 利用 壓縮氣體 產(chǎn)生的動力，將包裹在金屬顆粒表面的表達載體 DNA打入受體細胞中，使目的基因與其整合并表達的方法。 應用： 單子葉植物 ，但成本較高 花粉管通道法 B、將目的基因導入 動物細胞 方法： 顯微注射法 步驟： （ 1）首先將含有目的基因的表達載體 提純 。 （ 2）從雌性體內(nèi)取出受精卵，采用 顯微注 射儀 進行顯微注射。 （ 3）再將注射了目的基因的受精卵，經(jīng) 胚 胎早期培養(yǎng)一段時間后 ，再移植到雌 性動物的輸卵管或子宮內(nèi)，使其發(fā)育 稱為具有 新現(xiàn)狀 的動物。 C、將目的基因導入 微生物細胞 受體： 由于 原核生物 具有繁殖快，多為單細胞，遺傳物質相對較少等特點，因此。早期的基因工程操作都用 原核生物 作為受體細胞，其中以 大腸桿菌 應用最為廣泛。 導入方法：
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