專題1基因工程12基因工程的基本操作程序修改(編輯修改稿)
2024-10-08 20:28 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 （ 3） 花粉管通道法 將目的基因?qū)雱游锛毎? ① 方法：顯微注射法 ② 程序： 顯微注射法 含目的基因的表達載體 動物的受精卵 含目的基因的受精卵 早期胚胎 雌性動物輸卵管或子宮 轉(zhuǎn)基因 動物 為什么將目的基因?qū)雱游锛毎Ｓ玫氖荏w細胞是受精卵？ 顯微 注射 分裂 分化 移 植 發(fā)育 將目的基因?qū)胛⑸锛毎? ① 原核生物特點：繁殖快、單細胞、遺傳物質(zhì)少 ② 方法： 用 Ca2+處理細胞 感受態(tài)細胞 表達載體與感受態(tài)細胞混合 感受態(tài)細胞吸收 DNA分子 四、目的基因的檢測與鑒定 —— 檢查是否成功 (檢查是否成功 ) 分子水平檢測 個體水平鑒定： ① 檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因 ② 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA ③ 檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等 DNA分子雜交 DNA分子雜交 抗原 抗體雜交 目的基因的檢測與鑒定 1. 檢測轉(zhuǎn)基因生物的 DNA上是否插入了目的基因 提取受體生 物全部 DNA 適當限制 酶切割 DNA片段 與同位素標記的含 目的基因片段基因探針雜交 （表明目的基因已插入） 顯出雜交帶 提取受體生 物全部 適當限制 酶切割 與同位素標記的含目的基因片段基因探針雜交顯出雜交帶（表明目的基因已插入）提取受體生物全部適當限制酶切割與同位素標記的含目的基因片段基因探針雜交顯出雜交帶（表明目的基因已插入）提取受體生物全部適當限制酶切割與同位素標記的含目的基因片段基因探針雜交顯出雜交帶2. 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA 用同位素標記的 目的基因片段雜交 顯出雜交帶 （表明目的基因已轉(zhuǎn)錄出了 mRNA） 檢測 DNA利用的是 DNA與 DNA雜交，檢測 mRNA利用的是 DNA與 mRNA雜交。 提取受體生物的 mRNA ① 方法 :分 子 雜 交 ② 過程 : ① 方法：抗原 — 抗體雜交 3 檢測目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì) 提取受體生物的蛋白質(zhì) 與相應抗體雜交 顯出雜交帶 （表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品） （二）、鑒定（個體生物學水平） 抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等 ② 過程： 歸納步驟 歸納 : 基因工程的基本操作程序 1. 獲取目的基因 ? 從基因文庫 ? 利用 PCR ? 化學方法人工合成 2. 構(gòu)建基因表達載體 ? 目的基因、啟動子、終止子、標記基因 3. 將目的基因?qū)胧荏w細胞 ? 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、顯微注射法 4. 目的基因的檢測與鑒定 ? 檢測：是否插入、轉(zhuǎn)錄、翻譯 ? 鑒定： 練習 1： (2022理綜山東卷 )為擴大可耕地面積，增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關(guān)注。我國科學家應用耐鹽
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