1-2基因工程的基本操作程序(新)xxxx(2)(編輯修改稿)
2025-01-26 01:51 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 、將目的基因?qū)胧荏w細胞將目的基因?qū)胧荏w細胞的原理：、將目的基因?qū)胧荏w細胞的原理：借鑒借鑒 細菌或病毒侵染細胞細菌或病毒侵染細胞 的途徑的途徑 。常用的受體細胞：、常用的受體細胞：動物、植物、微生物。（ 1） .將目的基因?qū)胫参锛毎?）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法三、將目的基因?qū)胧荏w細胞三、將目的基因?qū)胧荏w細胞—— 最常用 方法、經(jīng)濟有效轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)化 的概念：的概念： 目的基因 進入 受體細胞內(nèi)并在受體細胞中 維持穩(wěn)定和表達 的過程。轉(zhuǎn)化的方法：、轉(zhuǎn)化的方法：1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 ⑴ 適用范圍： 雙子葉 植物和 裸子 植物； (2)原理： Ti質(zhì)粒 上的 TDNA可以轉(zhuǎn)移到受體細胞，并整合到受體細胞染色體的 DNA上。三、目的基因?qū)胧荏w細胞構(gòu)建基因表達載體轉(zhuǎn)入 農(nóng)桿菌植物細胞導入穩(wěn)定維持和表達③ 過程：（ 1） .將目的基因?qū)胫参锛毎?）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法2）基因槍法3）花粉管通道法三、將目的基因?qū)胧荏w細胞三、將目的基因?qū)胧荏w細胞—— 最常用 方法、經(jīng)濟有效—— 單子葉植物常用、準確但 成本高—— 我國獨創(chuàng)、 簡便經(jīng)濟轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)化 的概念：的概念： 目的基因 進入 受體細胞內(nèi)并在受體細胞中 維持穩(wěn)定和表達 的過程。轉(zhuǎn)化的方法：、轉(zhuǎn)化的方法：（ 2） .將目的基因?qū)雱游锛毎?顯微注射技術(shù)2）將目的基因?qū)雱游锛毎?顯微注射技術(shù)： 受精卵 :目的基因表達載體提純 取卵（受精卵） 顯微注射 受精卵 新性狀動物（ 1） .將目的基因?qū)胫参锛毎?）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法2）基因槍法3）花粉管通道法三、將目的基因?qū)胧荏w細胞三、將目的基因?qū)胧荏w細胞（ 2） .將目的基因?qū)雱游锛毎?3） .將目的基因?qū)胛⑸锛毎?Ca2+處理顯微注射技術(shù)—— 最常用 方法、經(jīng)濟有效—— 單子葉植物常用、準確但 成本高—— 我國獨創(chuàng)、 簡便經(jīng)濟轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)化 的概念：的概念： 目的基因 進入 受體細胞內(nèi)并在受體細胞中 維持穩(wěn)定和表達 的過程。轉(zhuǎn)化的方法：、轉(zhuǎn)化的方法：3)將目的基因?qū)胛⑸锛毎?微生物作受體細胞原因：繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對少② 常用菌： 大腸桿菌③ 常用法： Ca2+處理獲得感受態(tài)細胞④ 過程：Ca2+處理處理大腸桿菌大腸桿菌感受態(tài)感受態(tài) 細胞細胞感受態(tài)細胞感受態(tài)細胞 吸收吸收 DNA表達載體表達載體與感受態(tài)與感受態(tài)細胞混合細胞混合 方 法 受體 細 胞 其他 處 理 或特點植物細 胞農(nóng) 桿菌 轉(zhuǎn) 化 法基因 槍 法花粉管 通道 法體 細 胞、受精卵植物 組織 培養(yǎng)（脫分化和再分化）動 物 細 胞 顯 微注射法 受精卵 動 物 細 胞培養(yǎng)早期胚胎培養(yǎng)胚胎移植或胚胎分割移植微生物 細 胞 Ca2+處 理法（感受 態(tài)細 胞）原核 細 胞 繁殖快，多 為單細 胞， 遺傳 物 質(zhì) 少（農(nóng)桿菌 Ti質(zhì)粒的 TDNA的特點：即能進入受體細胞，又能與受體細胞的染色體 DNA整合）雙子葉、裸子 四、目的基因的檢測與鑒定導入過程完成后，全部受體細胞都能攝 入重組 DNA分子
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