基因工程的基本操作程序(共55張ppt)(編輯修改稿)
2025-01-25 17:39 本頁面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 個(gè)數(shù)是 B1000個(gè)脫氧核苷酸對(duì)，即 2023個(gè)核苷酸。由于 A=T=460個(gè)，所以， C=G=540個(gè)。所以，一個(gè)目的基因有胞嘧啶脫氧核苷酸 540個(gè)。 擴(kuò)增 4代可產(chǎn)生 16個(gè) DNA分子，根據(jù) DNA半保留復(fù)制原則，其中有一個(gè) DNA分子 “相當(dāng) ”于親代的 DNA。所以，在擴(kuò)增儀中應(yīng)放入胞嘧啶脫氧核苷酸數(shù)為（ 161） *540=8100個(gè)。 在已知序列信息的情況下，獲取目的基因的最方便方法是A、化學(xué)合成法 B、基因組文庫法C、 cDNA文庫法 D、聚合酶鏈反應(yīng)下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是① 從基因文庫中獲取目的基因 ② 利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 ③ 反轉(zhuǎn)錄法 ④ 通過DNA合成儀利用化學(xué)方法人工合成A． ①②③④ B． ①②③ C． ②③④ D． ②③AD二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建 —— 基因工程的核心目的：所需物質(zhì)：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。它們各自的作用是什么 ?基因表達(dá)載體的組成：復(fù)制原點(diǎn) +目的基因 +啟動(dòng)子 +終止子 +標(biāo)記基因它們各自的作用是什么 ?啟動(dòng)子： 位于基因的首端的一段特殊的 DNA片斷，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能 驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出 mRNA，最終獲得蛋白質(zhì)終止子： 位于基因的尾端的一段特殊的 DNA片斷， 能終止 mRNA的轉(zhuǎn)錄標(biāo)記基因 的作用是 為了 鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的細(xì)胞篩選出來① 載體 與 表達(dá)載體 的區(qū)別：二者都有標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)兩部分 DNA片段。表達(dá)載體在載體基礎(chǔ)上增加了目的基因、啟動(dòng)子、終止子三部分結(jié)構(gòu)② 用到的工具酶： 既用到限制酶切割載體，又用到 DNA連接酶將目的基因和載體拼接，兩種酶作用的化學(xué)鍵都是磷酸二酯鍵③ 啟動(dòng)子、終止子 對(duì)于目的基因表達(dá)必不可少④ 目的基因不能單獨(dú)進(jìn)入受體細(xì)胞， 必需以表達(dá)載體的方式攜帶進(jìn)去。注意啟 動(dòng) (終 止 )轉(zhuǎn)錄啟 動(dòng) (終 止 )翻 譯作用位于 DNA上位于 mRNA上位置DNA片段三個(gè)相 鄰 堿基本 質(zhì)啟 動(dòng) (終 止 )子啟始 (終 止 )密 碼 子三 .將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞： ：將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法—— 顯微注射法—— 感受態(tài)細(xì)胞目的基因進(jìn)入 _________內(nèi)，并且在 受體細(xì)胞內(nèi)維持 _____和 _____的過程受體細(xì)胞穩(wěn)定 表達(dá)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法：（ 1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 ① 農(nóng)桿菌特點(diǎn)： 易感染雙子葉植物和裸子植物，對(duì)大多數(shù)單子葉植物沒有感染能力 ② 原理： Ti質(zhì)粒上的 TDNA可以轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞染色體的 DNA上。③ 過程：④ 優(yōu)點(diǎn) 經(jīng)濟(jì)和有效（ 2）基因槍法（ 3）花粉管通道法將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞① 方法：顯微注射法② 程序：目的基因表達(dá)載體提純 取卵（受精卵） 顯微注射 受精卵 新性狀動(dòng)物將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞① 原核生物特點(diǎn)： 繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)少② 方法： 用 Ca2+處理細(xì)胞 感受態(tài)細(xì)胞 表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合 感受態(tài)細(xì)胞吸收 DNA分子 四、目的基因的檢測(cè)與鑒定導(dǎo)入過程完成后，全部受
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