12基因工程的基本操作程序1(編輯修改稿)
2025-03-26 12:11 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 __、 ___________ 、 __________________、 ________________。 ⑤方式：以 _____方式擴(kuò)增，即 ____（ n為擴(kuò)增循 環(huán)的次數(shù)） ⑥結(jié)果： 四種脫氧核苷酸 DNA引物 熱穩(wěn)定 DNA聚合酶 指數(shù) 2n 使目的基因的片段在 短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增 模板 DNA PCR的基本反應(yīng)步驟 變性 9095?C 延伸 7075?C 退火 5560?C PCR總結(jié)： PCR技術(shù)擴(kuò)增與 DNA復(fù)制的比較 PCR技術(shù) DNA復(fù)制 相同點(diǎn) 原理 原料 條件 不同點(diǎn) 解旋方式 場(chǎng)所 酶 結(jié)果 堿基互補(bǔ)配對(duì) 四種脫氧核苷酸 模板、能量、酶 DNA在 高溫 下變性 解旋 解旋酶催化 體外 復(fù)制 細(xì)胞核內(nèi) 熱穩(wěn)定的 DNA聚合酶 細(xì)胞內(nèi)的 DNA聚合酶 大量的 DNA片段 形成整個(gè) DNA分子 根據(jù)已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)出相應(yīng)的 mRNA序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)出它的結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列，再通過(guò)化學(xué)方法，以單核苷酸為原料合成目的基因 。 蛋白質(zhì)的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列 推測(cè) 推測(cè) 目的基因 化學(xué)合成 （三）化學(xué)方法人工合成目的基因 人工合成 (基因比較小，核苷酸序列已知 ) DNA合成儀 ? 從基因文庫(kù)中獲取 ? 利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增 ? 利用化學(xué)方法人工合成 歸納：獲取目的基因的方法 用一定的 _________切割 質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切 口，露出 ____________。 用 _____________切割目 的基因，使其產(chǎn)生 _____ __________________。 將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的 ______處， 再加入適量 ___________，形成了一個(gè)重組 DNA分子（重組質(zhì)粒） 限制酶 黏性末端或平末端 同一種限制酶 相同的黏性末端或平末端 切口 DNA連接酶 : 二、構(gòu)建 表達(dá) 載體 —— 核心 基因表達(dá)載體的目的 （ 1）使目的基因在受體細(xì)胞中 穩(wěn)定存在并可以 遺傳給下一代 ； （ 2）使目的基因能夠 表達(dá)和發(fā)揮 作用。 科學(xué)家在培育抗蟲(chóng)棉時(shí)，經(jīng)歷了多次失敗，才獲得成功。 起初把蘇云金芽孢桿菌的 抗蟲(chóng)基因 插入載體質(zhì)粒中，然后導(dǎo)入棉花的受精卵中，結(jié)果抗蟲(chóng)基因在棉花體內(nèi)沒(méi)有表達(dá)。 然后在插入抗蟲(chóng)基因的質(zhì)粒中插入 啟動(dòng)子(抗蟲(chóng)基因首端 )，導(dǎo)入棉花受精卵，長(zhǎng)成的棉花植株還是沒(méi)有抗蟲(chóng)能力?？茖W(xué)家又在有啟動(dòng)子、抗蟲(chóng)基因的質(zhì)粒中插入 終止子 (抗蟲(chóng)基因末端 )，導(dǎo)入棉花受精卵，結(jié)果成長(zhǎng)的植株，有了抗蟲(chóng)能力。 資 料 : ： 它們有什么作用？
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