新人教版生物選修312基因工程的基本操作程序(編輯修改稿)
2024-12-23 19:44 本頁面
【文章內容簡介】 酶： 既用到限制酶切割載體，又用到 DNA連接酶將目的基因和載體拼接，兩種酶作用的化學鍵都是磷酸二酯鍵 ③ 啟動子、終止子 對于目的基因表達必不可少 ④ 目的基因不能單獨進入受體細胞， 必需以表達載體的方式攜帶進去。 注意 三、將目的基因導入受體細胞 （一）轉化： （二）方法 將目的基因導入 植物細胞 將目的基因導入 動物細胞 將目的基因導入 微生物細胞 農桿菌轉化法 基因槍法 花粉管通道法 —— 顯微注射法 —— 感受態(tài)細胞 目的基因進入 _________內，并且在 受體細胞內維持 _____和 _____的過程 受體細胞 穩(wěn)定 表達 將目的基因導入植物細胞的方法： （ 1） 農桿菌轉化法 ① 農桿菌特點： 易感染雙子葉植物和裸子植物，對大多數(shù)單子葉植物沒有感染能力 ② 原理： Ti質粒上的 TDNA可以轉移到受體細胞，并整合到受體細胞染色體的 DNA上。 ③ 過程： ④ 優(yōu)點 （ 2） 基因槍法 （ 3） 花粉管通道法 將目的基因導入動物細胞 ① 方法：顯微注射法 ② 程序： 目的基因表達載體提純 取卵（受精卵） 顯微注射 受精卵 新性狀動物 將目的基因導入微生物細胞 ① 原核生物特點：繁殖快、單細胞、遺傳物質少 ② 方法： 用 Ca2+處理細胞 感受態(tài)細胞 表達載體與感受態(tài)細胞混合 感受態(tài)細胞吸收 DNA分子 四、目的基因的檢測與鑒定 —— 檢查是否成功 （一）、檢測 檢測轉基因生物染色體的 DNA上是否插入了目的基因 (關鍵步驟 ) ① .首先取出轉基因生物的基因組 DNA ② .用含目的基因的 DNA片段用放射性同位素等作標記 ,以此做探針 ③ .使探針和轉基因生物的基因組雜交 ,若顯示出雜交帶 ,表明染色體已插入染色體 DNA中 （ 1） 方法 : DNA分子雜交 （ 2）過程 : 歸納步驟 DNA分子雜交示意圖 采用一定的技術手段，將兩種生物的 DNA分子的單鏈放在一起，如果這兩個單鏈具有互補的堿基序列，那么，互補的堿基序列就會結合在一起，形成雜合雙鏈區(qū)；在沒有互補堿基序列的部位，仍然是兩條游離的單鏈。 P15思考與探究 （二）、鑒定（個體生物學水平） 檢測目的基因是否轉錄出了 mRNA 檢測目的基因是否翻譯成蛋白質 抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等 ① 方法 : 分 子 雜 交 方法 : 抗原抗體雜交 ② 過程 : 用上述探針和轉基因生物的 mRNA雜交 ,若出現(xiàn)雜交帶 ,表明目的基因轉錄出了 mRNA 歸納步驟 (四 )目的基因的檢測與鑒定 —— 檢查是否成功 檢測 —
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