基因工程的基本操作程序-文庫吧在線文庫
【正文】 的基因的方法 ： 人工合成 從基因文庫中獲得目的基因 PCR技術擴增 從 基因文庫 中獲得目的基因 概念 : 將含有某種生物不同基因的許多 DNA片段，導入受體菌 的群體中儲存，各個受體菌分別含有這種生物的不同的基因，稱為 基因庫 。 怎樣從基因文庫中得到我們所需的目的基因 ? 根據(jù)基因的 核苷酸序列，基因的功能，基因在染色體上的位置，基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 mRNA，以及基因的表達產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特殊性 來獲得目的基因。 基因表達載體組分 目的基因 啟動子： 是一段有特殊結構的 DNA片段，位于基因的首段，它是 RNA聚合酶 識別的結合部位 ，有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄 mRNA。 應用： 單子葉植物 ，但成本較高 花粉管通道法 B、將目的基因?qū)?動物細胞 方法： 顯微注射法 步驟： （ 1）首先將含有目的基因的表達載體 提純 。 目的基因是否 轉(zhuǎn)錄出了 mRNA。 檢測目的基因 是否翻譯成蛋白質(zhì) 方法： 抗原 —— 抗體分子雜交 步驟： （ 1）將轉(zhuǎn)基因生物的 蛋白質(zhì) 提取出來。 答案： B 利用外源基因在受體細胞中表達，可生產(chǎn)人類所需要的產(chǎn)品。檢測這種堿基序列改變必須使用的酶是 （ ） A．解旋酶 B． DNA連接酶 C．限制性內(nèi)切酶 D． RNA聚合酶 解析：檢測這種堿基序列改變需將被測基因從 DNA上切下來進行擴增，該過程需要限制性內(nèi)切酶。 （ 3）使探針與基因組 DNA雜交 ，如果顯示出 雜 交帶 ，說明目的基因已經(jīng)插入染色體 DNA 中。早期的基因工程操作都用 原核生物 作為受體細胞，其中以 大腸桿菌 應用最為廣泛。表達載體在載 體基礎上增加了目的基因、啟動子、終止子 三部分結構 . ② 用到的工具酶： 既用到限制酶切割載體，又 用到 DNA連接酶將目的基因和載體拼接，兩 種酶作用的化學鍵
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