基因工程的基本操作程序-wenkub
2023-01-26 17:54:33 本頁面
【正文】 RNA，以及基因的表達產物蛋白質等特殊性 來獲得目的基因。 目的基因的獲取 基因表達載體的構建 將目的基因導入受體細胞 目的基因的檢測與鑒定 概念： 一、目的基因的獲取 目的基因 ： 主要是指編碼蛋白質的基因， 例如，與優(yōu)良品質相關的基因，與生物藥物和保健品相關的基因，以及與工業(yè)所需酶相關的基因，也可以是一些具有調控作用的因子。 獲取目的基因的方法 ： 人工合成 從基因文庫中獲得目的基因 PCR技術擴增 從 基因文庫 中獲得目的基因 概念 : 將含有某種生物不同基因的許多 DNA片段，導入受體菌 的群體中儲存，各個受體菌分別含有這種生物的不同的基因，稱為 基因庫 。 利用 PCR技術擴增 目的基因 定義： PCR是 多聚酶鏈式反應 的縮寫，是一項在 生物體外 復制特定 DNA片段的核酸合成技術，通過這一技術，可以在短時間內大量擴增目的基因。 (DNA變性） （ 2）將溫度降至 55℃ ~60℃ ，使兩種 引物 分別與 模板 DNA的一端互補序列 互補配對 。 終止子： 也是一段有特殊結構的 DNA片段，位于基因的末端，使 轉錄在這里終止。 注意 三、 將 目的基因 導入 受體 A、將目的基 因導入 植物細胞 農桿菌轉換法 （最常用） 基因槍法 花粉管通道法 農桿菌轉換法 農桿菌： 是一種在土壤中生活的微生物，能在自然界感染 雙子葉植物和裸子植物 ，而對大多數(shù)單子葉植物 沒有感染能力。 （ 2）從雌性體內取出受精卵，采用 顯微注 射儀 進行顯微注射。 導入方法： （ 1） 首先用 Ca2+處理細胞，使細胞處于一種能 吸 收周圍環(huán)境中 DNA分子的生理狀態(tài)，這種細 胞稱為 感受態(tài)細胞 。 檢測目的基因是否 翻譯成蛋白質 。 目的基因是否 轉錄出了 mRNA 方法： 分子雜交技術 步驟： （ 1）將轉基因生物
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