高中生物選修三基因工程的基本操作程序-wenkub
2023-01-24 13:17:08 本頁面
【正文】 包括非編碼區(qū)和內(nèi)含子 原核細(xì)胞 真核細(xì)胞 不同點(diǎn) 編碼區(qū)是 _____的 編碼區(qū)是間隔的、 _____的 相同點(diǎn) 都由能夠編碼蛋白質(zhì)的 ______和具有調(diào)控作用的 ______區(qū)組成的 原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)比較 思考 編碼相同數(shù)目氨基酸的蛋白質(zhì)，原核細(xì)胞與真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)一樣長嗎？ 連續(xù) 不連續(xù) 編碼區(qū) 非編碼 目的基因的獲取 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 目的基因的檢測與鑒定 基因工程基本操作的四個步驟 一、目的基因的獲取 (一 )、目的基因主要是 ______________________ 編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 請舉出三個以上的例子 （二）、獲取目的基因的常用方法有哪些 ? 從基因文庫中獲取 利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增 人工合成 請閱讀 P9第一和二兩段 從基因文庫中獲取目的基因 將含有某種生物不同基因的許多DNA片斷，導(dǎo)入到受體菌的群體中，各個受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為 基因文庫 基因文庫 基因組文庫 部分基因文庫 （如 :cDNA文庫） （ 1） .基因文庫 ① 基因組文庫的構(gòu)建 （ 2） .基因文庫的構(gòu)建方法 通過對受體菌的培養(yǎng)而儲存基因 ② cDNA文庫的構(gòu)建 反轉(zhuǎn)錄法： 以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使 RNA為模板，反轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)的單鏈 DNA，然后在酶的作用下合成雙鏈 DNA，從而獲得所需的基因。 c、延伸 （ 70℃ 75℃ ）：在Taq酶 的作用下，合成與模板互補(bǔ)的 ________。 （ 5） 復(fù)制原點(diǎn)：是轉(zhuǎn)錄和復(fù)制的起點(diǎn)。 資 料 : 科學(xué)家在培育抗蟲棉時，起初把蘇云金芽孢桿菌的抗蟲基因插入載體質(zhì)粒中，然后導(dǎo)入棉花的受精卵中，結(jié)果抗蟲基因在棉花體內(nèi)沒有表達(dá)。表達(dá)載體在載體基礎(chǔ)上增加了目的基因、啟動子、終止子三部分結(jié)構(gòu) ② 用到的工具酶： 既用到限制酶切割載體，又用到 DNA連接酶將目的基因和載體拼接，兩種酶作用的化學(xué)鍵都是磷酸二酯鍵 ③ 啟動子、終止子 對于目的基因表達(dá)必不可少 ④ 目的基因不能單獨(dú)進(jìn)入受體細(xì)胞， 必需以表達(dá)載體的方式攜帶進(jìn)去。 ①特點(diǎn) : 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法： （ 1）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞 能感染 雙子葉植物 和 祼子植物 ,對 大多數(shù)單子葉植物 沒有 感染能力 ② 過程 ： Ti質(zhì)粒的 T— DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到其染色體上 ③ 適用生物： 雙子葉植物 、 祼子植物 。 目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后，是否都能穩(wěn)定維持 和表達(dá)？ 不一定，需要檢測 ： 分子雜交技術(shù)： （ 1） DNA分子與 DNA分子的之間雜交 （ 2） DNA分子與 RNA分子的之間雜交 （ 3）蛋白質(zhì)分子（抗原與抗體）之間雜交 ： 抗蟲、抗病接種實(shí)驗(yàn)，活性比較實(shí)驗(yàn) 轉(zhuǎn)基因生 物的 DNA 探針 15N 15N 14N 14N （ 1）檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的 DNA上是否插入了 目的基因 基因探針：
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