基因工程的基本操作程序(ppt55頁)-wenkub
2023-01-26 17:38:55 本頁面
【正文】 一蛋白質(zhì)的氨基酸序列，通過密碼子推算出其基因序列，然后直接合成目的基因，其過程如下： (2023 目的基因 DNA分子雜交 mRNA 分子雜交 ________,從 分 子 水 平 檢 測 的 方 法 是 采 用______________技術(shù) 。 ②將重組表達載體 DNA分子與感受態(tài)細胞混合，在一定溫度下完成轉(zhuǎn)化過程。 (1)將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ?________轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法。 DNA解鏈為單鏈 55～ 60 想一想 1． PCR過程中 ， 需要解旋酶嗎 ？ 所需要的DNA聚合酶應(yīng)具有什么特點 ？ 【 提示 】 PCR過程中， DNA雙鏈解開是在高溫下完成的，不需要解旋酶；由于 PCR過程溫度較高，所以需要能耐高溫的 DNA聚合酶。 基因組 部分基因 體外 DNA雙鏈復(fù)制 (4)過程： 第一步：加熱至 90 ～95℃ ,_______________ 。 基因 基因文庫包括兩種： ________文庫，即包含一種生物所有基因的文庫； __________文庫 ,即只包含一種生物的一部分基因的文庫，如 cDNA文庫。 [難點 ] 。 [重點 ] 。 PCR技術(shù)擴增目的基因 (1)PCR的含義：是一項在生物 ______復(fù)制特定 DNA片段的核酸合成技術(shù) 。 第二步：冷卻至 _________℃ ， 引物與兩條單鏈 DNA相應(yīng)互補序列結(jié)合； 第三步：加熱至 70～ 75℃ ， 熱穩(wěn)定 DNA聚合酶 (Taq酶 )從引物起始進行互補鏈的合成 。 如果基因比較 ___,核苷酸序列又已知 ,也可以通過 DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成 。 目的基因 農(nóng)桿菌 (2)將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛Ｓ玫姆椒ㄊ?__________技術(shù) 。 顯微注射 受精卵 Ca2＋ 感受態(tài) 想一想 2． 從細胞器的功能上分析 ， 若通過基因工程生產(chǎn)人的糖蛋白 ， 可以用大腸桿菌嗎 ？ 【 提示 】 不可以，糖蛋白上的糖鏈是在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體上加工完成的，而內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體存在于真核細胞中，大腸桿菌是原核生物，細胞中不含有這兩種細胞器。 ___________水平的鑒定。青島市高二期末 )1970年，科學(xué)家證實了 RNA病毒能依賴 RNA合成DNA的過程，并發(fā)現(xiàn)了催化此過程的酶。 (3)由圖中信息分析可知 ， 催化 ②⑤ 過程的酶都是 ______________， 兩者在作用特性上的區(qū)別是____________________________________ ____________________________________。①過程是由 RNA合成 DNA的過程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶進行催化。 【 答案 】 (1)反轉(zhuǎn)錄酶 (或逆轉(zhuǎn)錄酶 ) 分解RNA (2)穩(wěn)定 (3)DNA聚合酶 催化 ⑤ 過程的酶耐高溫 (4)60 互動探究 (1)上述過程中需要限制酶和 DNA連接酶嗎 ？ (2)由 mRNA逆轉(zhuǎn)錄形成的 DNA具有啟動子嗎 ? 【 提示 】 (1)不需要。 (3)PCR技術(shù)需要耐高溫的 DNA聚合酶 要點二 基因表達載體的構(gòu)建 ：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在 ， 并且可以遺傳給下一代 ， 使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用 。 (3)終止子：一段有特殊結(jié)構(gòu)的 DNA短片段 ,
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