高中生物選修三基因工程的基本操作程序(編輯修改稿)
2025-02-05 13:17 本頁面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 體的構(gòu)建 核心 IMN ： ① 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并遺傳給子代 。 ② 同時(shí)使目的基因能表達(dá)和發(fā)揮作用。 (3)終止子：是使轉(zhuǎn)錄在需要的地方停止 (4)標(biāo)記基因：是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來 (2)啟動(dòng)子：是 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合部位 (1)目的基因 不同受體細(xì)胞，目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法不同，基因表達(dá)載體的構(gòu)建有所差異。 （ 5） 復(fù)制原點(diǎn)：是轉(zhuǎn)錄和復(fù)制的起點(diǎn)。 二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建 —— 核心 質(zhì)粒 DNA分子 限制酶處理 兩個(gè)切口 獲得目的基因 DNA連接酶 重組 DNA分子（重組質(zhì)粒） 同一種 一個(gè)切口 兩個(gè)黏性末端 復(fù)制原點(diǎn) +啟動(dòng)子 +目的基因 +終止子 +標(biāo)記基因 尋根問底： 將生物的所有 DNA直接導(dǎo)入受體細(xì)胞不是更簡(jiǎn)便嗎？如果這么做，結(jié)果會(huì)怎樣？ 有人采用總 DNA注射法進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化：即將一個(gè)生物中的總 DNA提取出來，通過注射或花粉管通道法導(dǎo)入受體細(xì)胞，沒有進(jìn)行表達(dá)載體的構(gòu)建。 這種方法針對(duì)性差，完全靠運(yùn)氣，也無法確定什么基因?qū)肓耸荏w細(xì)胞。此法目前爭(zhēng)議頗多，嚴(yán)格來說不算基因工程。 資 料 : 科學(xué)家在培育抗蟲棉時(shí)，起初把蘇云金芽孢桿菌的抗蟲基因插入載體質(zhì)粒中，然后導(dǎo)入棉花的受精卵中，結(jié)果抗蟲基因在棉花體內(nèi)沒有表達(dá)。 然后在插入抗蟲基因的質(zhì)粒中插入抗蟲基因 啟動(dòng)子 ，導(dǎo)入棉花受精卵，長(zhǎng)成的棉花植株還是沒有抗蟲能力?？茖W(xué)家又在有啟動(dòng)子、抗蟲基因的質(zhì)粒中插入抗蟲基因 終止子 ，導(dǎo)入棉花受精卵，結(jié)果成長(zhǎng)的植株，有了抗蟲能力。 資料證明：表達(dá)載體構(gòu)建組成要完整 ① 載體 與 表達(dá)載體 的區(qū)別：二者都有標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)兩部分 DNA片段。表達(dá)載體在載體基礎(chǔ)上增加了目的基因、啟動(dòng)子、終止子三部分結(jié)構(gòu) ② 用到的工具酶： 既用到限制酶切割載體，又用到 DNA連接酶將目的基因和載體拼接，兩種酶作用的化學(xué)鍵都是磷酸二酯鍵 ③ 啟動(dòng)子、終止子 對(duì)于目的基因表達(dá)必不可少 ④ 目的基因不能單獨(dú)進(jìn)入受體細(xì)胞， 必需以表達(dá)載體的方式攜帶進(jìn)去。 注意 ( ) ① 利用 mRNA反轉(zhuǎn)錄形成 ②從基因組文庫(kù)中提取 ③ 從受體細(xì)胞中提取 ④利用 PCR技術(shù) ⑤ 利用 DNA轉(zhuǎn)錄 ⑥人工合成 A.①②③⑤ B.①②⑤⑥ C.①②③④ D.①②④⑥ 隨堂闖關(guān)隨堂闖關(guān)1．在已知 基因的核苷酸 序列的情況下，獲取目的基因的最方便方法是 A、化學(xué)合成法 B、基因組文庫(kù)法 C、 CDNA文庫(kù)法 D、聚合酶鏈反應(yīng) 3. 在基因工程中，把選出的一個(gè)目的基因（共1000個(gè)脫氧核苷酸對(duì)，其中腺嘌嶺脫氧核苷酸是460個(gè)）放入 DNA擴(kuò)增儀中擴(kuò)增 4次，那么，在擴(kuò)增儀中應(yīng)放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個(gè)數(shù)是（ ）個(gè) A. 540 B. 8100 C. 17280 D. 7560 ①同一種限制酶 ②具有抗性基因的質(zhì)粒 ③ RNA聚合酶
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