高中生物選修三基因工程的基本操作程序(更新版)
【正文】 病毒侵染細(xì)胞的途徑。 這種方法針對(duì)性差，完全靠運(yùn)氣，也無(wú)法確定什么基因?qū)肓耸荏w細(xì)胞。 依據(jù)：目的基因的有關(guān)信息。 基因工程的基本操作程序 補(bǔ)充： 非編碼區(qū) 非編碼區(qū) 編碼區(qū) 編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游 與 RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn) 啟動(dòng)子 終止子 啟動(dòng)子： 位于基因首端一段能與 RNA聚合酶結(jié)合并能起始 mRNA合成的序列。 目的基因的 mRNA 單鏈 DNA 反轉(zhuǎn)錄酶 DNA聚合酶 雙鏈 DNA (目的基因 ) ③ 基因組文庫(kù)和部分基因組文庫(kù) (cDNA文庫(kù) )比較 （ 3）構(gòu)建基因文庫(kù)的目的 怎樣從基因文庫(kù)中得到我們所需的目的基因呢 ? 便于在 不知道目的基因核苷酸序列的情況下，獲得所需的目的基因。 二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建 —— 核心 質(zhì)粒 DNA分子 限制酶處理 兩個(gè)切口 獲得目的基因 DNA連接酶 重組 DNA分子（重組質(zhì)粒） 同一種 一個(gè)切口 兩個(gè)黏性末端 復(fù)制原點(diǎn) +啟動(dòng)子 +目的基因 +終止子 +標(biāo)記基因 尋根問(wèn)底： 將生物的所有 DNA直接導(dǎo)入受體細(xì)胞不是更簡(jiǎn)便嗎？如果這么做，結(jié)果會(huì)怎樣？ 有人采用總 DNA注射法進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化：即將一個(gè)生物中的總 DNA提取出來(lái)，通過(guò)注射或花粉管通道法導(dǎo)入受體細(xì)胞，沒(méi)有進(jìn)行表達(dá)載體的構(gòu)建。 注意 ( ) ① 利用 mRNA反轉(zhuǎn)錄形成 ②從基因組文庫(kù)中提取 ③ 從受體細(xì)胞中提取 ④利用 PCR技術(shù) ⑤ 利用 DNA轉(zhuǎn)錄 ⑥人工合成 A.①②③⑤ B.①②⑤⑥ C.①②③④ D.①②④⑥ 隨堂闖關(guān)隨堂闖關(guān)1．在已知 基因的核苷酸 序列的情況下，獲取目的基因的最方便方法是 A、化學(xué)合成法 B、基因組文庫(kù)法 C、 CDNA文庫(kù)法 D、聚合酶鏈反應(yīng) 3. 在基因工程中，把選出的一個(gè)目的基因（共1000個(gè)脫氧核苷酸對(duì)，其中腺嘌嶺脫氧核苷酸是460個(gè)）放入 DNA擴(kuò)增儀中擴(kuò)增 4次，那么，在擴(kuò)增儀中應(yīng)放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個(gè)數(shù)是（ ）個(gè) A. 540 B. 8100 C. 17280 D. 7560 ①同一種限制酶 ②具有抗性基因的質(zhì)粒 ③ RNA聚合酶 ④目的基因 ⑤ DNA連接酶 ⑥四種脫氧核苷酸 ⑦ ATP A．①②③④⑤⑥⑦ B．①②④⑤⑥⑦ C．①②③④⑤ D．①②④⑤⑦ 5.（多選）一個(gè)基因表達(dá)載體的構(gòu)建應(yīng)包括 A．目的基因 B．啟動(dòng)子 C．終止子 D．標(biāo)記基因 ABCD D ? 常用的受體細(xì)胞： 大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動(dòng)植物細(xì)胞等。 變性 方法： DNA分子雜交技術(shù) （ 2）檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA 探針 15N 15N 轉(zhuǎn)基因生物 的 mRNA 14N 14N 如果顯示出雜交帶，就表明待測(cè)樣品目的基因已
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