高中生物選修三基因工程的基本操作程序-在線瀏覽
2025-02-26 13:17本頁(yè)面
【正文】 _________. ② 原理： __________ ④ 方式：以 _____方式擴(kuò)增，即 ____（ n為擴(kuò)增循 環(huán)的次數(shù)） ⑤ 結(jié)果： 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 體外 特定 DNA片段 DNA復(fù)制 已知基因的核苷酸序列 四種脫氧核苷酸 一對(duì)引物 DNA聚合酶 指數(shù) 2n 使目的基因的片段在短時(shí)間內(nèi)成百萬(wàn)倍地?cái)U(kuò)增 利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 ⑥ 過(guò)程： a、 DNA變性 （ 90℃ 95℃ ）：雙鏈 DNA模板在熱作用下，_____斷裂，形成 ________ b、退火 （ 復(fù)性 55℃ 65℃ ）：系統(tǒng)溫度降低， 引物 與 DNA模板結(jié)合，形成局部________。 氫鍵 單鏈 DNA 雙鏈 DNA鏈 ：每重復(fù)一次，目的基因增加 ___倍 一 ⑥ 過(guò)程： PCR反應(yīng)體系中目的基因成 指數(shù) (2n)形式擴(kuò)增 DNA復(fù)制 PCR技術(shù) 場(chǎng)所 原理 條件 解旋方式 酶 特點(diǎn) 結(jié)果 PCR技術(shù)擴(kuò)增與 DNA復(fù)制的比較 堿基互補(bǔ)配對(duì)原則 堿基互補(bǔ)配對(duì)原則 四種脫氧核苷酸、模板、酶、 ATP 四種脫氧核苷酸、模板、酶、 引物 DNA在高溫下變性解旋 解旋酶催化解旋 半保留復(fù)制、邊解旋變復(fù)制 半保留復(fù)制、全解旋再?gòu)?fù)制 體外復(fù)制 主要在細(xì)胞核內(nèi) 大量的 DNA片段 形成整個(gè) DNA分子 熱穩(wěn)定的 DNA聚合酶 細(xì)胞內(nèi)的 DNA聚合酶、解旋酶、 DNA連接酶等 蛋白質(zhì)的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 基因的核苷酸序列 目的基因 化學(xué)合成 推測(cè) 推測(cè) 人工合成法： 在 基因較小，核苷酸序列已知的情況下， 可以利用 DNA合成儀人工合成 化學(xué)法合成的目的基因含 內(nèi)含子、啟動(dòng)子和終止子 嗎？ ： 二 . 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 核心 IMN ： ① 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并遺傳給子代 。 (3)終止子：是使轉(zhuǎn)錄在需要的地方停止 (4)標(biāo)記基因：是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái) (2)啟動(dòng)子：是 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合部位 (1)目的基因 不同受體細(xì)胞，目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法不同，基因表達(dá)載體的構(gòu)建有所差異。 二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建 —— 核心 質(zhì)粒 DNA分子 限制酶處理 兩個(gè)切口 獲得目的基因 DNA連接酶 重組 DNA分子（重組質(zhì)粒） 同一種 一個(gè)切口 兩個(gè)黏性末端 復(fù)制原點(diǎn) +啟動(dòng)子 +目的基因 +終止子 +標(biāo)記基因 尋根問(wèn)底： 將生物的所有 DNA直接導(dǎo)入受體細(xì)胞不是更簡(jiǎn)便嗎？如果這么做，結(jié)果會(huì)怎樣？ 有人采用總 DNA注射法進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化：即將一個(gè)生物中的總 DNA提取出來(lái)，通過(guò)注射或花粉管通道法導(dǎo)入受體細(xì)胞，沒(méi)有進(jìn)行表達(dá)載體的構(gòu)建。此法目前爭(zhēng)議頗多，嚴(yán)格來(lái)說(shuō)不算基因工程。 然后在插入抗蟲基因的質(zhì)粒中插入抗蟲基因 啟動(dòng)子 ，導(dǎo)入棉花受精卵，長(zhǎng)成的棉花植株還是沒(méi)有抗蟲能力。
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