高中生物選修三基因工程的基本操作程序-在線瀏覽
2025-02-26 13:17本頁面
【正文】 _________. ② 原理： __________ ④ 方式：以 _____方式擴增，即 ____（ n為擴增循 環(huán)的次數(shù)） ⑤ 結(jié)果： 多聚酶鏈式反應 體外 特定 DNA片段 DNA復制 已知基因的核苷酸序列 四種脫氧核苷酸 一對引物 DNA聚合酶 指數(shù) 2n 使目的基因的片段在短時間內(nèi)成百萬倍地擴增 利用 PCR技術(shù)擴增目的基因 ⑥ 過程： a、 DNA變性 （ 90℃ 95℃ ）：雙鏈 DNA模板在熱作用下，_____斷裂，形成 ________ b、退火 （ 復性 55℃ 65℃ ）：系統(tǒng)溫度降低， 引物 與 DNA模板結(jié)合，形成局部________。 氫鍵 單鏈 DNA 雙鏈 DNA鏈 ：每重復一次，目的基因增加 ___倍 一 ⑥ 過程： PCR反應體系中目的基因成 指數(shù) (2n)形式擴增 DNA復制 PCR技術(shù) 場所 原理 條件 解旋方式 酶 特點 結(jié)果 PCR技術(shù)擴增與 DNA復制的比較 堿基互補配對原則 堿基互補配對原則 四種脫氧核苷酸、模板、酶、 ATP 四種脫氧核苷酸、模板、酶、 引物 DNA在高溫下變性解旋 解旋酶催化解旋 半保留復制、邊解旋變復制 半保留復制、全解旋再復制 體外復制 主要在細胞核內(nèi) 大量的 DNA片段 形成整個 DNA分子 熱穩(wěn)定的 DNA聚合酶 細胞內(nèi)的 DNA聚合酶、解旋酶、 DNA連接酶等 蛋白質(zhì)的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 基因的核苷酸序列 目的基因 化學合成 推測 推測 人工合成法： 在 基因較小，核苷酸序列已知的情況下， 可以利用 DNA合成儀人工合成 化學法合成的目的基因含 內(nèi)含子、啟動子和終止子 嗎？ ： 二 . 基因表達載體的構(gòu)建 核心 IMN ： ① 使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在并遺傳給子代 。 (3)終止子：是使轉(zhuǎn)錄在需要的地方停止 (4)標記基因：是鑒別受體細胞中是否含有目的基因從而將含有目的基因的細胞篩選出來 (2)啟動子：是 RNA聚合酶識別和結(jié)合部位 (1)目的基因 不同受體細胞，目的基因?qū)胧荏w細胞的方法不同，基因表達載體的構(gòu)建有所差異。 二、基因表達載體的構(gòu)建 —— 核心 質(zhì)粒 DNA分子 限制酶處理 兩個切口 獲得目的基因 DNA連接酶 重組 DNA分子（重組質(zhì)粒） 同一種 一個切口 兩個黏性末端 復制原點 +啟動子 +目的基因 +終止子 +標記基因 尋根問底： 將生物的所有 DNA直接導入受體細胞不是更簡便嗎？如果這么做，結(jié)果會怎樣？ 有人采用總 DNA注射法進行遺傳轉(zhuǎn)化：即將一個生物中的總 DNA提取出來，通過注射或花粉管通道法導入受體細胞，沒有進行表達載體的構(gòu)建。此法目前爭議頗多，嚴格來說不算基因工程。 然后在插入抗蟲基因的質(zhì)粒中插入抗蟲基因 啟動子 ，導入棉花受精卵，長成的棉花植株還是沒有抗蟲能力。
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