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基因工程的基本操作程序-在線瀏覽

2024-10-22 20:45本頁面
  

【正文】 cDNA合成過程 ? 第一步,反轉(zhuǎn)錄酶以 RNA為模板合成一條與 RNA互補的 DNA單鏈,形成 RNADNA雜交分子。 ? 第三步,以單鏈 DNA為模板,在 DNA聚合酶的作用下合成另一條互補的 DNA鏈,形成雙鏈 DNA分子。 獲取目的基因 ?從基因文庫中獲取 ?利用 PCR技術(shù)擴增 ?利用化學(xué)方法人工合成 構(gòu)建表達載體 表達載體的組成 1. 目的基因 2. 啟動子 3. 終止子 4. 標(biāo)記基因 基因工程載體的構(gòu)建需要考慮哪些因素 ( 1)基因的特點:如果一個來自動物的目的基因含有內(nèi)含子,就不能用于轉(zhuǎn)基因植物,因為動物中內(nèi)含子的剪接系統(tǒng)與植物的不同,植物不能將動物基因的內(nèi)含子剪切掉,只能用該基因的 cDNA。 ( 2)要選擇強啟動子或組織特異性啟動子。如果希望基因在生物的某個組織表達,如只在植物種子中表達,就要選擇種子中特異表達的啟動子。
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