12基因工程的基本操作程序(二)-在線瀏覽
2025-04-09 12:11本頁面
【正文】 火： 冷卻至 55～ 60℃引物與 部分 模板的單鏈DNA的特定互補部位相配對和結(jié)合 ?延伸： 加熱至 70～ 75℃以目的基因為模板，合成互補的新 DNA鏈 變性 退火 延伸 ?3. 人工合成 —— 根據(jù)已知的氨基酸序列合成 DNA 蛋白質(zhì)的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列 推測 推測 目的基因 化學(xué)合成 二 .基因表達載體的構(gòu)建 —— 核心 質(zhì)粒 DNA分子 一個 切口 兩個 黏性末端 兩個 切口 獲得目的基因 DNA 連接酶 重組 DNA分子（重組質(zhì)粒） 同一種 限制酶 目的基因與運載體的結(jié)合過程，實際上是不同來源的基因重組的過程。 它們各自的作用是什么 ? 目的基因 +啟動子 +終止子 +標記基因 +復(fù)制原點 啟動子： 位于基因的首端的一段特殊的 DNA片斷，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能 驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出 mRNA，最終獲得蛋白質(zhì) 終止子： 位于基因的尾端的一段特殊的 DNA片斷， 能終止 mRNA的轉(zhuǎn)錄 標記基因 的作用是 為了 鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的細胞篩選出來 復(fù)習(xí)回顧 基因工程的基本操作程序的四個步驟是？核心是？ 目的基因指的是什么基因？ 獲取目的基因常用的三種方法是？其中人工合成法又包括哪兩種 ? 基因文庫包括哪兩類？它們有什么區(qū)別？ PCR的原理是？ PCR擴增過程中的解旋方式是？PCR需要的條件有？ 基因表達載體的構(gòu)建的目的是？ 一個基因表達載體的組成包括哪幾部分？ 標記基因的作用是？ 啟動子，終止子的位置，作用？起始密碼子，終止密碼子呢？ 三、將目的基因?qū)胧荏w細胞 （一）轉(zhuǎn)化： （二）方法 將目的基因?qū)? 植物細胞 將目的基因?qū)? 動物細胞 將目的基因?qū)? 微生物細胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 （雙、裸） 基因槍法（ 單 ） 花粉管通道法 —— 顯微注射技術(shù) —— 用鈣離子處理細胞 得到 感受態(tài)細胞 目的基因進入
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