12基因工程的基本操作程序(二)(參考版)
2025-03-10 12:11本頁(yè)面
【正文】 ③ 過(guò)程 ： （ 2） 基因槍法 （ 3） 花粉管通道法 將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞 ① 方法：顯微注射法 ② 程序： 目的基因表達(dá)載體提純 取卵（受精卵） 顯微注射 受精卵 新性狀動(dòng)物 將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞 ① 原核生物特點(diǎn)：繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)少 ② 方法： 用 Ca2+處理細(xì)胞 感受態(tài)細(xì)胞 表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合 感受態(tài)細(xì)胞吸收 DNA分子 （二）方法 將目的基因?qū)? 植物細(xì)胞 將目的基因?qū)? 動(dòng)物細(xì)胞 將目的基因?qū)? 微生物細(xì)胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 （雙、裸） 基因槍法（ 單 ） 花粉管通道法 —— 顯微注射技術(shù) —— 用鈣離子處理細(xì)胞 得到 感受態(tài)細(xì)胞 四、目的基因的檢測(cè)與鑒定 —— 檢查是否成功 （一）、檢測(cè) 檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的 DNA上 是否插入了目的基因 (關(guān)鍵步驟 ) ①首先取出轉(zhuǎn)基因生物的基因組 DNA ② 用含 目的基因的 DNA片段 用放射性同位素等作標(biāo)記 ,以此做 探針 ③ 使探針和轉(zhuǎn)基因生物的基因組雜交 ,若顯示出雜交帶 ,表明基因已插入染色體 DNA中 （ 1） 方法 : DNA分子雜交 （ 2）過(guò)程 : 知識(shí)延伸 —— DNA分子雜交技術(shù) 該方法是根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，把互補(bǔ)的雙鏈DNA解開(kāi)，把單股的 DNA小片段用同位素、熒光分子或化學(xué)發(fā)光催化劑等進(jìn)行標(biāo)記，之后同被檢測(cè)的 DNA中的同源互補(bǔ)序列雜交，從而檢出所要查明的 DNA或基因。 目的： 組成： 使目的基因在 受體細(xì)胞 中穩(wěn)定存在，且可以遺傳給下一代， 使目的基因能夠 表達(dá) 和 發(fā)揮作用 。通過(guò)此技術(shù)，可獲取大量的目的基因。 但如果 所需要的目的基因的序列完全不知 ，或 只知道目的基因序列的一段 ，或 想從一種生物體內(nèi)獲得許多基因 ，或者 想知道這種生物與另一種生物之間有多少基因不同 ，或者 想
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