12基因工程的基本操作程序_2(參考版)
2025-01-06 02:48本頁面
【正文】 尋根問底： 。 （二）鑒定（個體生物學水平） 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA 檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等 ① 方法 : 分 子 雜 交 方法 : 抗原 抗體雜交 ②過程 :用上述探針和轉(zhuǎn)基因生物的 mRNA雜交 ,若出現(xiàn)雜交帶 ,表明目的基因轉(zhuǎn)錄出了 mRNA。 基因探針通過分子雜交與目的基因結(jié)合，產(chǎn)生雜交信號，能從浩翰的基因組中把目的基因顯示出來。 適用于 被子植物 （ 1）方法：顯微注射法 （將基因表達載體提純，用顯微儀注射到 受精卵 中） （ 2）操作程序 : 提純含目的基因表達載體 取受精卵 顯微注射 移植到子宮 受精卵發(fā)育 新性狀動物 常用法 ： Ca2+處理 常用菌 ：大腸桿菌 微生物作受體細胞原因： 繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對少 過程： Ca2+處理大腸桿菌 感受態(tài)細胞 表達載體與感受態(tài)細胞混合 感受態(tài)細胞吸收 DNA 思考：為什么要用Ca2+處理受體細胞？ 用 Ca2＋ 處理，增加細菌細胞壁的通透性 受精卵 體細胞 受精卵 細胞 /個體 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 基因槍法 花粉管通道法 顯微注 射技術(shù) 用 Ca2+處理成感受態(tài)細胞 采用基因工程的方法培育抗蟲棉，下列導入目的基因的作法正確的是（ ） DNA序列，與質(zhì)粒重組，導入細菌，用該細菌感染棉的體細胞，再進行組織培養(yǎng) DNA序列，與質(zhì)粒重組，注射到棉的子房并進入受精卵 DNA序列，注射到棉受精卵中 四、目的基因的檢測與鑒定 ? 檢測 : ? 是否插入目的基因 ? 是否轉(zhuǎn)錄 ? 是否翻譯 ? 鑒定 : ? 分子水平鑒定 ? 個體生物學水平鑒定 檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的 DNA上是否插入了目的基因 ① 首先取出轉(zhuǎn)基因生物的基因組 DNA； （ 1）方法 : DNA分子雜交 （ 2）過程 : ② 將含目的基因的 DNA片段用放射性同位素等作標記 ,以此做 探針 ； ③ 使探針和轉(zhuǎn)基因生物的基因組雜交 ,若顯示出雜交帶 ,表明染色體已插入染色體 DNA中。 （ 2）基因槍法 適用于 單子葉植物 （ 3）花粉通道法 植物花粉在柱頭上萌發(fā)后，花粉管要穿過花柱直通胚囊。 （一）轉(zhuǎn)化： 目的基因進入 _________內(nèi)，并且在 受體細胞內(nèi)維持 _____和 _____的過程 受體細胞 穩(wěn)定 表達 （二）方法 將目的基因?qū)? 植物細胞 將目的基因?qū)?
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