基因工程的基本操作程序(2)(參考版)
2024-09-22 20:52本頁(yè)面
【正文】 除了上述的分子檢測(cè)外，有時(shí)還需要進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定，則應(yīng)做_____________和 _____________。 ? 基因工程是否成功，我們還要進(jìn)行最后的檢測(cè)和鑒定。如蟲(chóng)吃后中毒死亡，則說(shuō)明攝入了抗蟲(chóng)基因并得到表達(dá)。 方法 —— 用 Ca2+處理細(xì)胞 細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中 DNA分子的生理狀態(tài)。 ③ 例子：轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉 顯微注射法（最常用，最有效） （ 3）將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞 方法 —— 受體細(xì)胞 —— 受精卵 目的基因的表達(dá)載體 提純 取卵 （受精卵） 顯微注射 受精卵 發(fā)育 新性狀動(dòng)物 過(guò)程： 將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞 （ 2）將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞 過(guò)程： Ca2+處理受體細(xì)胞 感受態(tài)細(xì)胞 重組表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合 感受態(tài)細(xì)胞吸收 DNA分子 思考：早期的基因工程用什么作受體細(xì)胞？為什么？ 常用原核生物，因?yàn)樵松锓敝晨?、多為單?xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少等。 ② 常用金屬顆粒有鎢粉粒子和金粉粒子，粒子的直徑一般在 ～ 4um 。 ② 原理 ： Ti質(zhì)粒上的 TDNA（可轉(zhuǎn)移的 DNA）可以轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞染色體的 DNA上。 一 指數(shù) DNA合成儀人工合成 前提 ： 基因比較小、核苷酸序列已知 DNA合成儀 二：基因表達(dá)載體的構(gòu)建 ——基因工程的核心 1 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。 c、延伸 （ 70℃ 75℃ ）： 在 _____的作用下，合成與模板互補(bǔ)的 ________。 2. 基因文庫(kù)的種類 : 基因組文庫(kù)：
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