基因工程的基本操作程序新(1)(參考版)
2024-09-22 20:48本頁(yè)面
【正文】 （ 4）培養(yǎng)進(jìn)入了 β 珠蛋白基因的大腸桿菌，收集菌體，破碎后從中提取 β 珠蛋白。 （ 3）將表達(dá)載體導(dǎo)入無(wú)四環(huán)素抗性的大腸桿菌中，然后在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)大腸桿菌。假如讓你用基因工程的方法，使大腸桿菌生產(chǎn)出鼠的 β 珠蛋白，想一想，應(yīng)如何進(jìn)行設(shè)計(jì)？ （ 1）從小鼠中克隆出 β 珠蛋白基因的編碼序列（ cDNA)。 珠蛋白是動(dòng)物血紅蛋白的重要組成成分。思考與探究： ,你能分析出不能導(dǎo)入單子葉植物的原因嗎 ?若將一個(gè)抗病基因?qū)胄←溨?,理論上講你應(yīng)該怎樣做 ? ① 要選擇合適的農(nóng)桿菌菌株，因?yàn)椴皇撬械霓r(nóng)桿菌菌株都可以侵染單子葉植物；②要加趨化和誘導(dǎo)的物質(zhì)，一般為乙酰丁香酮等，目的是使農(nóng)桿菌向植物組織的受傷部位靠攏（趨化性）和激活農(nóng)桿菌的 Vir區(qū)（誘導(dǎo)）的基因，使 TDNA轉(zhuǎn)移并插入到染色體 DNA上。3 、思維誤區(qū)提示：不管目的基因?qū)胫参锛?xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞還是微生物細(xì)胞，都必須事先將目的基因與載體結(jié)合，這樣才能保證導(dǎo)入的目的基因穩(wěn)定地保存并復(fù)制和表達(dá)。 2 、方法、技巧、規(guī)律總結(jié)：轉(zhuǎn)基因植物、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物都是將目的基因以基因工程的方法導(dǎo)入相應(yīng)生物體內(nèi)，利用目的基因的表達(dá)得到人們所需要的產(chǎn)品或生物本身。必須構(gòu)建上述元件的主要理由是： （ 1） 生物之間進(jìn)行基因交流，只有使用 受體生物自身基因的啟動(dòng)子才能比較有利于基因的表達(dá)； （ 2） 通過(guò) cDNA文庫(kù)獲得的目的基因沒(méi)有啟動(dòng)子，只將編碼序列導(dǎo)入受體生物中無(wú)法轉(zhuǎn)錄； （ 3） 目的基因是否導(dǎo)入受體生物中需要有篩選標(biāo)記； （ 4） 為了增強(qiáng)目的基因的表達(dá)水平，往往還要增加一些其他調(diào)控元件，如增強(qiáng)子等； （ 5） 有時(shí)需要確定目的基因表達(dá)的產(chǎn)物存在于細(xì)胞的什么部位，往往要加上可以標(biāo)識(shí)存在部位的基因（或做成目的基因與標(biāo)識(shí)基因的融合基因），如綠色熒光蛋白基因等。 的名詞及對(duì)應(yīng)的內(nèi)容，正確的組合是 下列屬于獲取目的基因的方法的是 ( ) ① 利用 mRNA反轉(zhuǎn)錄形成②從基因組文庫(kù)中提取 ③從受體細(xì)胞中提取 ④利用 PCR技術(shù) ⑤利用 DNA轉(zhuǎn)錄 ⑥人工合成 A.①②③⑤ B.①②⑤⑥ C.①②③④ D.①②④⑥ 隨堂闖關(guān)隨堂闖關(guān)，該抗性基因在基因工程中的主要作用是 A． 提高受體細(xì)胞在自然環(huán)境中的耐藥性 B．有利于對(duì)目的基因是否導(dǎo)入進(jìn)行檢測(cè) C．增加質(zhì)粒分子的分子量
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