基因工程的基本操作程序ppt課件(參考版)
2024-08-16 04:29本頁面
【正文】 6 ． 檢測目 的基因是否導(dǎo)入和轉(zhuǎn)錄，常用分子雜交技術(shù)；檢測是否翻譯，常用抗原 — 抗體雜交技術(shù)。 4 ． 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法。 2 ． 基因表達(dá)載體的構(gòu)建是實施基因工程的第二步 ，也是基因工程的核心。 e ． 環(huán)境監(jiān)測。 c ． 鑒定物種親緣關(guān)系。 ② 應(yīng)用： DNA 探針可用來檢測 DNA 或 RNA 分子 ，因此其應(yīng)用 廣泛 ， 如： a ． 從基因文庫中準(zhǔn)確提取目的基因。 答案： C (1) 涉及目的基因的檢測與鑒定習(xí)題時 ， 應(yīng)注意審題 ， 辨清要求從 “ 分子水平 ” 還是從 “ 個體水平 ” 。 B 項利用了分子雜交技術(shù) (DNA 與 mRNA 之間雜交 ) 。下列選項中能說明目的基因完成了在受體細(xì)胞中表達(dá)的是 ( ) A ． 棉花二倍體細(xì)胞中檢測到細(xì)菌的抗蟲基因 B ． 大腸桿菌中檢測到人胰島素基因及其 mRNA C ． 山羊乳腺細(xì)胞中檢測到人生長激素的 DNA 序列 D ． 酵母菌細(xì)胞中提取到人干擾素蛋白 解析： 基 因的表達(dá)即能在受體細(xì)胞中提取到由目的基因控制合成的蛋白質(zhì)。下列敘述中錯誤的是 ( ) A ． 可用纖維素酶和果膠酶共同處理離體細(xì)胞 ， 獲得去壁體細(xì)胞 B ． 培育體細(xì)胞的培養(yǎng)基中需添加生 長素、細(xì)胞分裂素和青霉素 C ． 用相應(yīng)探針檢測愈傷組織的基因 ， 可判斷目的基因是否導(dǎo)入 D ． 用相應(yīng)探針檢測所培育植株基因 ， 可判斷目的基因是否表達(dá) 解析： 植物細(xì)胞的主要成分是纖維素和果膠 ， 因此可根 據(jù)酶的專一性原理 ， 可用纖維素酶和果膠酶共同處理離體細(xì)胞 ， 獲得去壁體細(xì)胞 ， A 項正確； 培育體細(xì)胞的培養(yǎng)基中需添加植物激素 ( 生長素、細(xì)胞分裂素 ) 和抗生素 ( 青霉素 ) ， B 項正確；用相應(yīng)探針檢測愈傷組織的基因 ， 可判斷目的基因是否導(dǎo)入 ， C 項正確；用相應(yīng)探針檢測所培育植株基因可判斷目的基因 是否導(dǎo)入 ，但不能判斷目的基因是否表達(dá)， D 項錯誤。 (3) 不論是復(fù)制水平、轉(zhuǎn)錄水平還是翻譯水平的檢測 ，都是在體外進(jìn)行的。 類型 步驟 檢測內(nèi)容 方法 結(jié)果顯示 分子水平檢測 第一步 目的基因是否進(jìn)入受體細(xì)胞 DNA分子雜交(DNA和DNA之間 ) 是否成功顯示出雜交帶 第二步 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA 分子雜交技術(shù)(DNA和mRNA之間 ) 是否成功顯示出雜交帶 第三步 目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì) 抗原 —抗體雜交 是否成功顯示出雜交帶 個體水平鑒定 需要做抗蟲、抗病的接種實驗，以確定是否有抗性以及抗性的程度；基因工程產(chǎn)品與天然產(chǎn)品的功能進(jìn)行活性比較，以確定二者的功能活性是否相同等 (1) DN A 探針是用放射性元素或熒光分子標(biāo)記的目的基因的脫氧核苷酸單鏈。 (3) 啟 動子與起始密碼子、終止子與終止密碼子的 比較。 答案： B (1) 基因表達(dá)載體也可以稱為重組載體 ( 如重組質(zhì)粒 ) 、重組 DNA 分子等。 答案： A 4 ． 如圖為基因表達(dá)載體的模式圖。 答案： D 即時演練 3 ． 下列關(guān)于目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的描述不正確的是 ( ) A ． 基因槍法導(dǎo)入植物體細(xì)胞的方法比較經(jīng)濟(jì)有效 B ． 顯微注射技術(shù)是轉(zhuǎn)基因動物中采用最多的方法 C ． 大腸桿菌最常用的轉(zhuǎn)化方法是使細(xì)胞的生理狀態(tài)發(fā)生改變 D ． 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞最常用的方法 解析： 不同生物目的基因?qū)氲姆?
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