12基因工程的基本操作程序zl4-在線瀏覽
2025-04-09 12:10本頁面
【正文】 提取 ④利用 PCR技術(shù)擴增 ⑤利用 DNA轉(zhuǎn)錄 ⑥人工合成 A．①②③⑤ B．①②⑤⑥ C．①②③④ D．①②④⑥ D C 復(fù)習(xí)： 目的基因？例子 ? 獲取目的基因的常用方法有哪些 ? 什么是基因文庫？種類？ 原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)？ 怎樣從基因文庫中得到我們所需的目的基因？ 基因組文庫？ cDNA文庫？ (二）利用 PCR技術(shù)擴增目的基因 PCR技術(shù) — 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) ? 原理： ? 前提： ? 條件： DNA雙鏈復(fù)制 一段已知目的基因的核苷酸序列 四種脫氧核苷酸 一對引物 熱穩(wěn)定 DNA聚合酶 (Taq酶） DNA的兩條鏈為模板 溫度控制 一、目的基因的獲取 變性： 加熱至 90～95℃ 雙鏈 DNA解鏈成為單鏈 DNA 退火： 冷卻至 55～60℃ 部分引物與模板的單鏈 DNA的特定互補部位相配對和結(jié)合 延伸： 加熱至 70～75℃ 以目的基因為模板，合成互補的新 DNA鏈 退火 變性 延伸 PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) ) (二）利用 PCR技術(shù)擴增目的基因 (三 ) 通過 DNA合成儀用化學(xué)的方法直接人工合成 一、目的基因的獲取 蛋白質(zhì)的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列 推測 推測 目的基因 化學(xué)合成 根據(jù)已知的氨基酸序列合成 DNA法： 在已知序列信息的情況下，獲取目的基因的最方便方法是 A、化學(xué)合成法 B、基因組文庫法 C、 cDNA文庫法 D、多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是 ①從基因文庫中獲取目的基因 ②利用 PCR技術(shù)擴增目的基因 ③反轉(zhuǎn)錄法 ④通過 DNA合成儀利用化學(xué)方法人工合成 A．①②③④ B．①②③ C．②③④ D．②③ A D 的內(nèi)容，正確的組合是 C 在基因工程中，把選出的目的基因（共 1000個脫氧核苷酸對，其中腺嘌呤脫氧核苷酸是 460個）放入 DNA擴增儀中擴增 4代，那么，在擴增儀中應(yīng)放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個數(shù)是 B 目的基因主要是指 _______________的結(jié)構(gòu)基因。（ 2）利用 PCR技術(shù)擴增目的基因，該技術(shù)是一項在 ________完成的核酸合成技術(shù)，前提條件是有一段已知目的基因的________序列，以便于合成 _________。 編碼蛋白質(zhì) 核苷酸 染色體 轉(zhuǎn)錄 表達(dá) 體外 核苷酸 引物 人工合成 二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建 （核心） _________切割 質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個切 口，露出 ____________。 ______處， 再加入適量 ___________，形成了一個重組 DNA分子（重組質(zhì)粒） 限制酶 黏性末端 同一種限制酶 的黏性末端 切口 DNA連接酶 相同 基因表達(dá)載體的組成： 目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。 。 質(zhì)是什么？ ？ ，應(yīng)如何操作？ ，有哪幾個步驟涉及到堿基
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