高中生物選修專題一基因工程-在線瀏覽
2025-02-26 13:14本頁面
【正文】 酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，是把梯子兩邊扶手的斷口連接起來，這樣一個重組的 DNA分子才能形成。 T4DNA連接酶：還能連平末端，但效率較低。 大腸桿菌 T4噬菌體 不同來源 DNA片斷結(jié)合 雙鏈斷開 EcoRI切割 ： 要讓一個從甲生物細胞內(nèi)取出來的基因在乙生物體內(nèi)進行表達，首先得將這個基因送到乙生物的細胞內(nèi)去。 將外源基因送入受體細胞。 作為運載體必須具備的條件 。 ，供重組 DNA的鑒定和選擇。 ② 不同點： 原核細胞基因的編碼區(qū)是連續(xù)的；真核細胞的編碼區(qū)是間隔的，不連續(xù)的。 目前被廣泛提取使用的目的基因有：蘇云金桿菌抗蟲基因、植物抗病基因（抗病毒、抗細菌 )、 人胰島素基 因等。 基因文庫中包含了一種生物所有的基因 ,這種基因文庫叫做 基因組文庫 。如：cDNA文庫 。 第二步：核酸酶 H使 RNADNA雜交分子中的 RNA鏈降 解，使之變成單鏈的 DNA。 26 ② 基因組文庫和 cDNA文庫的主要區(qū)別 文庫類型 cDNA文庫 基因組文庫 文庫大小 基因中啟動子（具有啟動作用的 DNA片段） 基因中內(nèi)含子 (位于編碼蛋白質(zhì)序列的非編碼 DNA片段） 基因多少 物種間的基因交流 小 大 無 有 無 有 某種生物的部分基因 某種生物的全部基因 可以 部分基因可以 ③ 怎樣從基因文庫中找到我們所需要的目的基因 根據(jù)目的基因的有關(guān)信息 例如，根據(jù)基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色體上的位置、基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 mRNA，以及基因的表達產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特性來獲取目的基因。 ④ 過程： （ 90～ 95 OC)： （ 55～ 60 OC)： （ 70～ 75 OC)： ： 雙鏈 DNA模板在熱的作用下，氫鍵斷裂形成單鍵 DNA 系統(tǒng)溫度降低，引物結(jié)合到互補 DNA鏈上，形成局部的雙鏈 DNA 在 Taq酶作用下，合成與模板互補 的 DNA子鏈，形成雙鏈 DNA 每重復(fù)一次，目的基因增加一倍 PCR擴增為指數(shù)形式擴增 2n(n為擴增循環(huán)的次數(shù)），在短時間內(nèi)擴增大量目的基因。 ② 同時使目的基因能表達和發(fā)揮作用。 質(zhì)粒 DNA分子 限制酶處理 一個切口 兩個黏性末端 兩個切口 獲得目的基因 DNA連接酶 重組 DNA分子（重組質(zhì)粒） 同一種 基因表達載體的構(gòu)建 33 三、將目的基因?qū)胧荏w細胞 ： 目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體 細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的工程 ： ① 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法：
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