高中生物選修專題一基因工程-wenkub
2023-01-24 13:14:41 本頁面
【正文】 因表達(dá)載體的構(gòu)建”也是考察的重點(diǎn)。 什么叫基因工程？ 基因工程又叫基因拼接技術(shù)或 DNA重組技術(shù)。能將外來的 DNA切斷，由于這種切割作用是在 DNA分子內(nèi)部進(jìn)行的，故名限制性內(nèi)切酶。 限制性內(nèi)切酶 特點(diǎn)： 特異性，即識(shí)別特定核苷酸序列，在特定的切點(diǎn)切割。 ② DNA連接酶 —— 分子縫合針： ：只能連黏性末端。能將外源基因送入細(xì)胞的工具就是 運(yùn)載體 。 ，便于供外源 DNA片段插入。 （ 2）真核生物基因結(jié)構(gòu) 主要是指編碼 蛋白質(zhì) 基因，也可以是一些具有調(diào)控作用的因子。 基因文庫中包含了一種生物的一部分基因 ,這種基因文庫叫做 部分基因文庫 。 第三步：以單鏈 DNA為模板，在 DNA聚合酶的作用下合 成另一條互補(bǔ)的 DNA鏈，形成雙鏈 DNA分子。 (3)用化學(xué)方法直接 人工合成目的基因 蛋白質(zhì)氨基酸序列 →mRNA 的核苷酸序列 → 目 的基因序列 → 目的基因 針對(duì)：基因比較小，核苷酸序列又已知 推測(cè) 化學(xué)合成 推測(cè) ： 二 . 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 —— 核心 IMN ： ①使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并遺傳給子代。 （ 1） 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞 ③ 基因槍法：單子葉植物。 基因槍法： 利用壓縮氣體產(chǎn)生的動(dòng)力 ，將包裹在金屬粒表面的表達(dá)載體 DNA打入受體細(xì)胞中，使目的基因與其整合并表達(dá)的方法 ① 操作方法： ② 金屬粒： 將目的基因?qū)雴巫尤~植物細(xì)胞 鎢粉粒子和金粉粒子，粒子的直徑一般在 ～ 4um 。小圖為微粒載片和阻擋網(wǎng)。 —— 個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定 抗蟲、抗病結(jié)種實(shí)驗(yàn)，活性比較實(shí)驗(yàn) 不能，受體細(xì)胞必須表現(xiàn)出特定的性狀，才能說明目的基因完成了 表達(dá) 。 提取 （ 3）檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 方法：抗原 抗體雜交 蘇云金桿菌 Bt毒素蛋白 將 Bt毒蛋白注射小鼠體內(nèi) 從小鼠血管抽出血液分離出抗 Bt毒素的抗體 抗體 蛋白質(zhì) 出現(xiàn)雜交帶 脫分化 組織培養(yǎng) 證明： 提取蛋白質(zhì)與 Bt毒素蛋白質(zhì)一樣 例：用棉鈴飼喂棉鈴蟲，如蟲吃后不出現(xiàn)中毒癥狀，說明未攝入目的基因或攝入目的基因未表達(dá)。其原理和聲音都與鳥槍相仿，成功率僅為千分之八。 （ 2）將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞 —— 顯微注射法。 (3)終止子 (4)標(biāo)記基因 (2)啟動(dòng)子 (1)目的基因 不同受體細(xì)胞，目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法不同，基因表達(dá)載體的構(gòu)建有所差異。 （ 2） 應(yīng)用 PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 ①
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