高中生物選修專題一基因工程(編輯修改稿)
2025-02-05 13:14 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 的慨念 ② 基因組文庫和 cDNA文庫的主要區(qū)別 ③ 怎樣從基因文庫中找到我們所需要的目的基因 ① 基因文庫和部分基因文庫的慨念 ： 將含有某種生物不同基因的許多 DNA片段 ,導入受體菌的群體中儲存 ,各個受體菌分別含有這種生物的不同的基因 ,稱為 基因文庫 。 基因文庫中包含了一種生物所有的基因 ,這種基因文庫叫做 基因組文庫 。 基因文庫中包含了一種生物的一部分基因 ,這種基因文庫叫做 部分基因文庫 。如：cDNA文庫 。 基因組文庫的建立方法 提取某種生物的全部 DNA 用適當?shù)南拗泼该盖? 一定大小的 DNA片段 將 DNA片段與運載體連接 導入受體菌中儲存（ 基因組文庫） 目的基因 分離 部分基因文庫的建立方法 mRNA 反轉(zhuǎn)錄酶 單鏈 DNA 合成 雙鏈 DNA（ cDNA） 載體 插入 導入 受體菌群（ cDNA文庫） 分離 目的基因 cDNA合成過程 第一步：反轉(zhuǎn)錄酶以 RNA為模板合成一條與 RNA互補的 DNA單鏈，形成 RNADNA雜交分子。 第二步：核酸酶 H使 RNADNA雜交分子中的 RNA鏈降 解，使之變成單鏈的 DNA。 第三步：以單鏈 DNA為模板，在 DNA聚合酶的作用下合 成另一條互補的 DNA鏈，形成雙鏈 DNA分子。 26 ② 基因組文庫和 cDNA文庫的主要區(qū)別 文庫類型 cDNA文庫 基因組文庫 文庫大小 基因中啟動子（具有啟動作用的 DNA片段） 基因中內(nèi)含子 (位于編碼蛋白質(zhì)序列的非編碼 DNA片段） 基因多少 物種間的基因交流 小 大 無 有 無 有 某種生物的部分基因 某種生物的全部基因 可以 部分基因可以 ③ 怎樣從基因文庫中找到我們所需要的目的基因 根據(jù)目的基因的有關信息 例如，根據(jù)基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色體上的位置、基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 mRNA，以及基因的表達產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特性來獲取目的基因。 （ 2） 應用 PCR技術擴增目的基因 ① 定義： ② 原理： DNA復制 PCR是多聚酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定 DNA片段的核酸合成技術，在短時間內(nèi)大量擴增目的基因 DNA分子熱變性（在 90～ 95 OC時，解旋，雙鏈分開溫度降低又結(jié)合成雙鏈）因此，在PCR技術中 不需要解旋酶 （與復制不同之在處 ) ③ 儀器： PCR擴增儀（自動調(diào)控溫度的儀器） ④ 條件： 有一段已知的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物，脫氧
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