高中生物選修專題一基因工程(編輯修改稿)
2025-02-05 13:14 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 的慨念 ② 基因組文庫(kù)和 cDNA文庫(kù)的主要區(qū)別 ③ 怎樣從基因文庫(kù)中找到我們所需要的目的基因 ① 基因文庫(kù)和部分基因文庫(kù)的慨念 ： 將含有某種生物不同基因的許多 DNA片段 ,導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存 ,各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因 ,稱為 基因文庫(kù) 。 基因文庫(kù)中包含了一種生物所有的基因 ,這種基因文庫(kù)叫做 基因組文庫(kù) 。 基因文庫(kù)中包含了一種生物的一部分基因 ,這種基因文庫(kù)叫做 部分基因文庫(kù) 。如：cDNA文庫(kù) 。 基因組文庫(kù)的建立方法 提取某種生物的全部 DNA 用適當(dāng)?shù)南拗泼该盖? 一定大小的 DNA片段 將 DNA片段與運(yùn)載體連接 導(dǎo)入受體菌中儲(chǔ)存（ 基因組文庫(kù)） 目的基因 分離 部分基因文庫(kù)的建立方法 mRNA 反轉(zhuǎn)錄酶 單鏈 DNA 合成 雙鏈 DNA（ cDNA） 載體 插入 導(dǎo)入 受體菌群（ cDNA文庫(kù)） 分離 目的基因 cDNA合成過(guò)程 第一步：反轉(zhuǎn)錄酶以 RNA為模板合成一條與 RNA互補(bǔ)的 DNA單鏈，形成 RNADNA雜交分子。 第二步：核酸酶 H使 RNADNA雜交分子中的 RNA鏈降 解，使之變成單鏈的 DNA。 第三步：以單鏈 DNA為模板，在 DNA聚合酶的作用下合 成另一條互補(bǔ)的 DNA鏈，形成雙鏈 DNA分子。 26 ② 基因組文庫(kù)和 cDNA文庫(kù)的主要區(qū)別 文庫(kù)類型 cDNA文庫(kù) 基因組文庫(kù) 文庫(kù)大小 基因中啟動(dòng)子（具有啟動(dòng)作用的 DNA片段） 基因中內(nèi)含子 (位于編碼蛋白質(zhì)序列的非編碼 DNA片段） 基因多少 物種間的基因交流 小 大 無(wú) 有 無(wú) 有 某種生物的部分基因 某種生物的全部基因 可以 部分基因可以 ③ 怎樣從基因文庫(kù)中找到我們所需要的目的基因 根據(jù)目的基因的有關(guān)信息 例如，根據(jù)基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色體上的位置、基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 mRNA，以及基因的表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特性來(lái)獲取目的基因。 （ 2） 應(yīng)用 PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 ① 定義： ② 原理： DNA復(fù)制 PCR是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定 DNA片段的核酸合成技術(shù)，在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因 DNA分子熱變性（在 90～ 95 OC時(shí)，解旋，雙鏈分開(kāi)溫度降低又結(jié)合成雙鏈）因此，在PCR技術(shù)中 不需要解旋酶 （與復(fù)制不同之在處 ) ③ 儀器： PCR擴(kuò)增儀（自動(dòng)調(diào)控溫度的儀器） ④ 條件： 有一段已知的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物，脫氧
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