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ae3-基因工程-基因工程的基本操作程序1(更新版)

2025-03-16 14:07上一頁面

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【正文】 沖液中與感受態(tài)細胞混合 ,在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收 DNA分子 ,完成轉(zhuǎn)化過程 . 第二步 目的基因在受體細胞內(nèi),隨其繁殖而 復(fù)制 ,由于細菌 繁殖的速度 非常快,在很短的時間內(nèi)就能獲得 大量 的目的基因。 ( 2)顯微注射法:利用微量注射器在顯微鏡下直接把目的基因注入宿主細胞。建立和使用基因文庫是分離高等真核生物基因的有效手段,對于基因定位和基因工程的研究都很有用。 目的基因的 mRNA 單鏈 DNA(cDNA) 雙鏈 DNA (即目的基因 ) 反轉(zhuǎn)錄 合成 2) 根據(jù)已知的氨基酸序列合成 DNA法 : 根據(jù) 已知 蛋白質(zhì)的 氨基酸序列 , 推測出相應(yīng)的 信使 RNA序列,然后按照 堿基互補配對 原則, 推測 出它的 結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列 ,再通過化學(xué)方法,以 單核苷酸為原料合成目的基因 。 用限制酶切斷成許多片段 1) 反轉(zhuǎn)錄法 : 以 目的基因 轉(zhuǎn)錄成的 信使 RNA為模板, 反轉(zhuǎn)錄 成互補的 單鏈 DNA,然后在酶的作用下 合成雙鏈 DNA,從而獲得所需的基因。經(jīng)過擴增得到大量這樣的細菌(或噬菌體),從中便可分離出所需基因的 DNA片段。 ( 1)電擊法:借助電擊儀高壓脈沖把目的基因打入宿主細胞。 ( 3)科斯質(zhì)粒是一種雜種質(zhì)粒,含有質(zhì)粒和 λ噬菌體的部分順序,很適合用作真核生物基因的載體。這樣,處理的受體細胞中真正攝入了目的基因的很少,必須將它從中檢測出來。 在基因操作的基本步驟中 , 不進行堿基互補配對的步驟是 ( ) A、 人工合成目的基因 B、 目的基因與運載體結(jié)合 C、 將目的基因?qū)胧荏w細胞 D、 目的基因的檢測和表達 C 練習(xí) 演講完畢,謝謝觀看!
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