ae3-基因工程-基因工程的基本操作程序1-文庫(kù)吧在線文庫(kù)
【正文】 因表達(dá)載體的構(gòu)建 1）用一定的 限制酶切割質(zhì)粒 ，使其出現(xiàn) 一個(gè)切口 ，露出 黏性末端 。 蛋白質(zhì)的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列 推測(cè) 推測(cè) 目的基因 化學(xué)合成 ? 上述三種目的基因提取的方法有何優(yōu)缺點(diǎn)？ 優(yōu)點(diǎn) 缺點(diǎn) 鳥槍法 反轉(zhuǎn)錄法 根據(jù)已知氨基酸合成 DNA法 操作簡(jiǎn)便廣泛使用 工作量大，盲目，分離出來的有時(shí)并非一個(gè)基因 專一性強(qiáng) 操作過程麻煩， mRNA很不穩(wěn)定，要求的技術(shù)條件較高 專一性最強(qiáng) 僅限于合成核苷酸對(duì)較少的簡(jiǎn)單基因 ? 哪些新技術(shù)能大大簡(jiǎn)化基因工程的操作技術(shù)？ 1） DNA序列自動(dòng)測(cè)序儀： 2） PCR技術(shù)： 對(duì)提取出來的基因進(jìn)行核苷酸序列分析。 ? 目的基因的提取方法 直接分離基因 人工合成基因 反轉(zhuǎn)錄法 根據(jù)已知的氨基酸序列合成 DNA ： 鳥槍法 1 . 鳥槍法（散彈射擊法） 用 限制酶 將 供體細(xì)胞 中的DNA切成許多片段 ，將這些片段分別 載入運(yùn)載體 ，然后通過運(yùn)載體分別轉(zhuǎn)入不同的受體細(xì)胞，讓供體細(xì)胞提供的外源DNA的所有片段分別在各個(gè) 受體細(xì)胞 中 大量復(fù)制 （即 擴(kuò)增 ），從中 找出含有目的基因 的細(xì)胞，再利用一定發(fā)方法將目的基因的 DNA片段 分離 出來。通過分子雜交的方法，可以篩選出包含有所需基因的 DNA片段的細(xì)菌（或噬菌體）。 步驟三：目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 ①直接導(dǎo)入法有電擊、顯微注射、直接吸收、基因槍等方法。 （ 2） λ噬菌體是一種細(xì)菌病毒，其環(huán)狀雙鏈 DNA可以作為目的基因的載體。 前三步的處理十分繁鎖，為保證目的基因得到有效利用，通常用大量的受體細(xì)胞來接受不多的目的基因。 1） 以下說法正確的是 （
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