基因工程3-3基因操作的工具酶-文庫吧在線文庫
【正文】 為 5’?II、 PolIPol每個成熟的大腸桿菌細胞中約有 400個分子的 Pol(2) 核苷酸 磷酸結(jié)合位點 —— 結(jié)合引物催化單核苷酸逐個地結(jié)合到 DNA模板的 3’OH末端，沿著引物的 3’OH方向按模板順序從5’?3’?所以 3’?(2)隨著反應(yīng)的進行， 5’一側(cè)的核苷酸不斷地被移去， 3’一側(cè)的核苷酸又按序地增補，于是缺口便沿著 DNA分子按合成的方向移動 —— 缺口平移 （ NickI）是一種內(nèi)切酶，它能夠水解單鏈或雙鏈 DNA，形成帶有 5’磷酸末端的單（寡）核苷酸。 Pol 3’的聚合酶活性和 3’? 而 BamH1. T4 DNA聚合酶也是一種多功能酶：(1)以填充反應(yīng)標記帶有 5’延伸末端的 dsDNA片段(2)*從 RNA鏈 由于核酸酶 SI能從 DNA片段中切除單鏈尾巴，因而在質(zhì)粒的重建和 DNA重組中被廣泛使用。2. 在基因工程中的應(yīng)用： 此酶是從乳白短桿菌（ Brevibacerium aldidum）中提取的。3. 在基因工程中的應(yīng)用：底物可以是ssDNA、 dsDNA或 RNA，也可以是核糖或脫氧核糖核苷三磷酸。8:40:1611,218:40 8:40:168:40:1611,218:40 8:40:168:40:16 三月 21三月 2120:40:1620:40:16March218:40 8:40:16 2023/3/11三月 MarchMarch 2023/3/1120238:40:16MarchMarch 2023/3/1120238:40:16MarchMarch2. 作用條件： 3. 在基因工程中的應(yīng)用： 禽成髓細胞瘤病毒（ AMV）逆轉(zhuǎn)錄酶(2)底物是 RNADNA雜交分子中的 RNA鏈，其水解方向有兩種：可在新合成的 DNA鏈上合成另一條互補 DNA。1. 逆轉(zhuǎn)錄酶也是一個多功能酶：(1) RNA依賴的 DNA聚合酶 以 RNA鏈為模板，以帶有 3’OH 末端的 DNA片段為引物，沿 5’ ? 3’ 方向合成 DNA鏈。I5’的外切酶活性 I 改變反應(yīng)體系中 DNase?mol/L）和高濃度的未標記的 dNTP（ 20?l總體積中含有 1用于制備 DNA探針(1)5’外切酶活性受到 5’?只作用于雙鏈 DNA（ dsDNA） 每分子 DNAPolPol和 Pol：(1)以四種三磷酸脫氧核糖核苷（ dNTP）為底物(2)到目前為止，已從 II的主要功能是參與 DNA的修復(fù)過程， PolI）I已得到高度純化，從 100(1) DNA模板結(jié)合位點 —— 結(jié)合模板5’?pol從 5’端切割下一個個單核苷酸。3’聚合酶活性的抑制?？捎糜谔钛a dsDNA上的缺口，以便有效地進行DNA重組在 DNA分子的單鏈缺口上， DNA聚合酶 I的5’??g純化的特定的 DNA片段，并加入適量的 DNase?mol/L）。 I的數(shù)量
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