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%ae3-基因工程-基因工程的基本操作程序1-全文預(yù)覽

2025-03-04 14:07 上一頁面

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【正文】 繁殖的速度 非常快,在很短的時(shí)間內(nèi)就能獲得 大量 的目的基因。 ( 1)質(zhì)粒是細(xì)菌染色體 DNA以外的環(huán)狀雙鏈 DNA分子,它能自我復(fù)制,也可整合到細(xì)胞染色體 DNA中與其一起表達(dá)。 ( 2)顯微注射法:利用微量注射器在顯微鏡下直接把目的基因注入宿主細(xì)胞。 ? 常用的受體細(xì)胞: 有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動(dòng)植物細(xì)胞等。建立和使用基因文庫是分離高等真核生物基因的有效手段,對(duì)于基因定位和基因工程的研究都很有用。這一定義也適用于線粒體 DNA和葉綠體 DNA,分別稱為某種生物的線粒體基因文庫或葉綠體基因文庫。 目的基因的 mRNA 單鏈 DNA(cDNA) 雙鏈 DNA (即目的基因 ) 反轉(zhuǎn)錄 合成 2) 根據(jù)已知的氨基酸序列合成 DNA法 : 根據(jù) 已知 蛋白質(zhì)的 氨基酸序列 , 推測(cè)出相應(yīng)的 信使 RNA序列,然后按照 堿基互補(bǔ)配對(duì) 原則, 推測(cè) 出它的 結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列 ,再通過化學(xué)方法,以 單核苷酸為原料合成目的基因 。 基因工程的基本操作程序主要包括 四個(gè)基本步驟: 1)目的基因的獲取 2)基因表達(dá) 載體的構(gòu)建 3)將目的基因 導(dǎo)入 受體細(xì)胞 4)目的基因的 檢測(cè) 與鑒定 步驟一: 目的基因的獲取 目的基因是人們所 需要轉(zhuǎn)移 或 改造 的基因 , 獲取目的基因是實(shí)施基因工程的第一步 。 用限制酶切斷成許多片段 1) 反轉(zhuǎn)錄法 : 以 目的基因 轉(zhuǎn)錄成的 信使 RNA為模板, 反轉(zhuǎn)錄 成互補(bǔ)的 單鏈 DNA,然后在酶的作用下 合成雙鏈 DNA,從而獲得所需的基因。 3)從基因文庫中獲取目的基因: 基因文庫 : 將含有某種生物不同基因的許多 DNA片段 ,導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存 ,各個(gè)受體菌分別含有這種生物的
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