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ae3-基因工程-基因工程的基本操作程序1-展示頁

2025-02-24 14:07本頁面
  

【正文】 的方法,可以篩選出包含有所需基因的 DNA片段的細(xì)菌(或噬菌體)。這一定義也適用于線粒體 DNA和葉綠體 DNA,分別稱為某種生物的線粒體基因文庫或葉綠體基因文庫。 使目的基因的片段在短時(shí)間內(nèi)成百萬倍地?cái)U(kuò)增。 目的基因的 mRNA 單鏈 DNA(cDNA) 雙鏈 DNA (即目的基因 ) 反轉(zhuǎn)錄 合成 2) 根據(jù)已知的氨基酸序列合成 DNA法 : 根據(jù) 已知 蛋白質(zhì)的 氨基酸序列 , 推測出相應(yīng)的 信使 RNA序列,然后按照 堿基互補(bǔ)配對(duì) 原則, 推測 出它的 結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列 ,再通過化學(xué)方法,以 單核苷酸為原料合成目的基因 。 ? 目的基因的提取方法 直接分離基因 人工合成基因 反轉(zhuǎn)錄法 根據(jù)已知的氨基酸序列合成 DNA : 鳥槍法 1 . 鳥槍法(散彈射擊法) 用 限制酶 將 供體細(xì)胞 中的DNA切成許多片段 ,將這些片段分別 載入運(yùn)載體 ,然后通過運(yùn)載體分別轉(zhuǎn)入不同的受體細(xì)胞,讓供體細(xì)胞提供的外源DNA的所有片段分別在各個(gè) 受體細(xì)胞 中 大量復(fù)制 (即 擴(kuò)增 ),從中 找出含有目的基因 的細(xì)胞,再利用一定發(fā)方法將目的基因的 DNA片段 分離 出來。 基因工程的基本操作程序主要包括 四個(gè)基本步驟: 1)目的基因的獲取 2)基因表達(dá) 載體的構(gòu)建 3)將目的基因 導(dǎo)入 受體細(xì)胞 4)目的基因的 檢測 與鑒定 步驟一: 目的基因的獲取 目的基因是人們所 需要轉(zhuǎn)移 或 改造 的基因 , 獲取目的基因是實(shí)施基因工程的第一步 。 如蘇云金芽孢桿菌的 抗蟲基因 ,還有植物的 抗病 ( 抗病毒 、 抗細(xì)菌 ) 基因 、種子 貯藏蛋白的基因 ,以及人的 胰島素基因 、 干擾素基因 等。 用限制酶切斷成許多片段 1) 反轉(zhuǎn)錄法 :
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