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ae3-基因工程-基因工程的基本操作程序1-在線瀏覽

2025-03-22 14:07本頁面
  

【正文】 以 目的基因 轉(zhuǎn)錄成的 信使 RNA為模板, 反轉(zhuǎn)錄 成互補(bǔ)的 單鏈 DNA,然后在酶的作用下 合成雙鏈 DNA,從而獲得所需的基因。 蛋白質(zhì)的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列 推測 推測 目的基因 化學(xué)合成 ? 上述三種目的基因提取的方法有何優(yōu)缺點(diǎn)? 優(yōu)點(diǎn) 缺點(diǎn) 鳥槍法 反轉(zhuǎn)錄法 根據(jù)已知氨基酸合成 DNA法 操作簡便廣泛使用 工作量大,盲目,分離出來的有時并非一個基因 專一性強(qiáng) 操作過程麻煩, mRNA很不穩(wěn)定,要求的技術(shù)條件較高 專一性最強(qiáng) 僅限于合成核苷酸對較少的簡單基因 ? 哪些新技術(shù)能大大簡化基因工程的操作技術(shù)? 1) DNA序列自動測序儀: 2) PCR技術(shù): 對提取出來的基因進(jìn)行核苷酸序列分析。 3)從基因文庫中獲取目的基因: 基因文庫 : 將含有某種生物不同基因的許多 DNA片段 ,導(dǎo)入受體菌的群體中儲存 ,各個受體菌分別含有這種生物的不同的基因 ,稱為基因文庫 (gene library) 基因組文庫 : 基因文庫中包含了一種生物所有的基因 ,這種基因文庫叫做基因組文庫 . 部分基因文庫 : 基因文庫中包含了一種生物的一部分基因 ,這種基因文庫叫做部分基因文庫 . 用 DNA重組技術(shù)將某種生物的總 DNA用特定的限制性內(nèi)切酶切割成一個個片段,然后將這些片段隨機(jī)地連接在某些質(zhì)?;蚱渌d體上,再將它們轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞中,通過細(xì)胞的增殖而構(gòu)成各個片段的無性繁殖系(克隆),當(dāng)這些克隆多到可以包括某種生物的全部基因時,這一批克隆的總體就稱為該種生物的基因文庫。為了有效地保存基因文庫,可通過細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上繁殖而使包含各個特定 DNA片段的細(xì)菌增多。經(jīng)過擴(kuò)增得到大量這樣的細(xì)菌(或噬菌體),從中便可分離出所需
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