ae3-基因工程-基因工程的基本操作程序1(存儲(chǔ)版)
【正文】 大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動(dòng)植物細(xì)胞等。 （ 1）質(zhì)粒是細(xì)菌染色體 DNA以外的環(huán)狀雙鏈 DNA分子，它能自我復(fù)制，也可整合到細(xì)胞染色體 DNA中與其一起表達(dá)。 步驟四：目的基因的檢測(cè)與鑒定 四環(huán)素 抗性基因 氨芐青霉 素抗性基因 不能，受體細(xì)胞必須表現(xiàn)出特定的性狀，才能說(shuō)明目的基因完成了 表達(dá) 。 例：用棉鈴飼喂棉鈴蟲(chóng)，如蟲(chóng)吃后不出現(xiàn)中毒癥狀，說(shuō)明未攝入目的基因或攝入目的基因未表達(dá)。 多細(xì)胞生物的檢測(cè)，將每個(gè)受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)并誘導(dǎo)發(fā)育成完整個(gè)體，檢測(cè)這些個(gè)體是否攝入目的基因，攝入的基因是否表達(dá)（是否表現(xiàn)出相應(yīng)的性狀）。 2）使含有目的基因的 重組質(zhì)粒進(jìn)入 受體細(xì)胞。 （ 4）基因槍法：在金屬微粒上涂一層目的基因，然后發(fā)射到宿主細(xì)胞中。 2）用 同一種 限制酶 切斷目的基因 ，使其產(chǎn)生 相同 的 黏性末端 。 使目的基因的片段在短時(shí)間內(nèi)成百萬(wàn)倍地?cái)U(kuò)增。 如蘇云金芽孢桿菌的 抗蟲(chóng)基因 ，還有植物的 抗病 （ 抗病毒 、 抗細(xì)菌 ） 基因 、種子 貯藏蛋白的基因 ，以及人的 胰島素基因 、 干擾素基因 等。為了有效地保存基因文庫(kù)，可通過(guò)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上繁殖而使包含各個(gè)特定 DNA片段的細(xì)菌增多。 ? 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的原理 借鑒 細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞 的途徑。質(zhì)粒通常還含有標(biāo)記基因，這可以從細(xì)胞的表型特征來(lái)識(shí)別。 ? 受體細(xì)胞攝入 DNA分子后就說(shuō)明目的基因完成了表達(dá)嗎？ 若不能表達(dá)，要對(duì)抗蟲(chóng)基因再進(jìn)行 修飾 。如蟲(chóng)吃后中毒死亡，則說(shuō)明攝入了抗蟲(chóng)基因并得到表達(dá)。淘汰無(wú)表達(dá)產(chǎn)物的菌落，保留有表達(dá)產(chǎn)物的進(jìn)一步培養(yǎng)、研究。 1）將細(xì)菌用 CaCl2處理 ，以 增大 細(xì)菌 細(xì)胞壁的通透性 。 （ 3）直接吸收法：把目的基因和宿主細(xì)胞混在一起，讓其吸收。 步驟二： 基
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