高中生物選修三基因工程的基本操作程序(存儲版)
【正文】 目的基因借助花粉管通道進(jìn)入受體細(xì)胞 十分簡便經(jīng)濟(jì) ③ 例： 轉(zhuǎn)基因抗蟲棉 ①細(xì)胞類型： ②操作程序 ： ___顯微注射法： （ 2） 將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞 發(fā)育成新性狀動物 移植到子宮或輸卵管 培養(yǎng)成早期胚胎 顯微注射 取受精卵（體內(nèi)或體外 受精） 提純含目的基因表達(dá)載體 受精卵 ③ 常用法： ②常用菌： ① 微生物作受體細(xì)胞原因： 繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對少 ④過程： 大腸桿菌 Ca2+處理 獲得感受態(tài)細(xì)胞 Ca2+處理 大腸桿菌 感 受 態(tài) 細(xì) 胞 表達(dá)載體 與感受態(tài) 細(xì)胞混合 感受態(tài)細(xì)胞 吸收 DNA ___感受態(tài)細(xì)胞法 （ 3）將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞 （ 3） .將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞 大腸桿菌細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是 : 首先用 Ca2+ 處理細(xì)胞 ,以 增大 細(xì)菌 細(xì)胞壁的通透性 ,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中 DNA分子的生理狀態(tài) ,這種細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞 . 第二步是將重組表達(dá)載體 DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合 ,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收 DNA分子 ,完成轉(zhuǎn)化過程 . 第二步 目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)，隨其繁殖而 復(fù)制 ，由于細(xì)菌 繁殖的速度 非?？欤诤芏痰臅r間內(nèi)就能獲得 大量 的目的基因。 細(xì)菌的檢測，將每個受體細(xì)胞單獨培養(yǎng)形成菌落，檢測菌落中是否有目的基因的表達(dá)產(chǎn)物。 —— 個體生物學(xué)水平的鑒定 （ 1）多細(xì)胞個體 抗蟲、抗病接種實驗，活性比較實驗 不能，受體細(xì)胞必須表現(xiàn)出特定的性狀，才能說明目的基因完成了 表達(dá) 。 ①特點 : 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法： （ 1）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞 能感染 雙子葉植物 和 祼子植物 ,對 大多數(shù)單子葉植物 沒有 感染能力 ② 過程 ： Ti質(zhì)粒的 T— DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到其染色體上 ③ 適用生物： 雙子葉植物 、 祼子植物 。 資 料 : 科學(xué)家在培育抗蟲棉時，起初把蘇云金芽孢桿菌的抗蟲基因插入載體質(zhì)粒中，然后導(dǎo)入棉花的受精卵中，結(jié)果抗蟲基因在棉花體內(nèi)沒有表達(dá)。 c、延伸 （ 70℃ 75℃ ）：在Taq酶 的作用下，合成與模板互補的 ________。 終止子： 位于基因的尾端的一段特殊的 DNA片段，它能阻礙 RNA聚合酶的移動，并使其從 DNA模板鏈上脫離下來，使轉(zhuǎn)錄終止。 非編碼區(qū) 非編碼區(qū) 編碼區(qū) 編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游 啟動子 終止子 編碼區(qū) 非編碼區(qū) 非編碼區(qū) 與 RNA聚合酶 結(jié)合位點 內(nèi)含子 外顯子 能夠編碼蛋白質(zhì)的序列叫做外顯子 不能夠編碼蛋白質(zhì)的序列叫做內(nèi)含子 啟動子 終止子 編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游 內(nèi)含子： 外顯子： 真核細(xì)胞的 基因結(jié)構(gòu) 編碼區(qū) 非編碼區(qū) 外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的序列 內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì)的序列 ：有調(diào)控作用的核苷酸序
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