高中生物選修三基因工程的基本操作程序-文庫吧資料
2025-01-15 13:17本頁面
【正文】 細胞混合 感受態(tài)細胞 吸收 DNA ___感受態(tài)細胞法 （ 3）將目的基因導入微生物細胞 （ 3） .將目的基因導入微生物細胞 大腸桿菌細胞最常用的轉化方法是 : 首先用 Ca2+ 處理細胞 ,以 增大 細菌 細胞壁的通透性 ,使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中 DNA分子的生理狀態(tài) ,這種細胞稱為感受態(tài)細胞 . 第二步是將重組表達載體 DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合 ,在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收 DNA分子 ,完成轉化過程 . 第二步 目的基因在受體細胞內，隨其繁殖而 復制 ，由于細菌 繁殖的速度 非?？?，在很短的時間內就能獲得 大量 的目的基因。 ①特點 : 農桿菌轉化法： （ 1）將目的基因導入植物細胞 能感染 雙子葉植物 和 祼子植物 ,對 大多數(shù)單子葉植物 沒有 感染能力 ② 過程 ： Ti質粒的 T— DNA可轉移至受體細胞并整合到其染色體上 ③ 適用生物： 雙子葉植物 、 祼子植物 。 ? 將目的基因導入受體細胞的原理 借鑒細菌或病毒侵染細胞的途徑。表達載體在載體基礎上增加了目的基因、啟動子、終止子三部分結構 ② 用到的工具酶： 既用到限制酶切割載體，又用到 DNA連接酶將目的基因和載體拼接，兩種酶作用的化學鍵都是磷酸二酯鍵 ③ 啟動子、終止子 對于目的基因表達必不可少 ④ 目的基因不能單獨進入受體細胞， 必需以表達載體的方式攜帶進去?？茖W家又在有啟動子、抗蟲基因的質粒中插入抗蟲基因 終止子 ，導入棉花受精卵，結果成長的植株，有了抗蟲能力。 資 料 : 科學家在培育抗蟲棉時，起初把蘇云金芽孢桿菌的抗蟲基因插入載體質粒中，然后導入棉花的受精卵中，結果抗蟲基因在棉花體內沒有表達。 這種方法針對性差，完全靠運氣，也無法確定什么基因導入了受體細胞。 （ 5） 復制原點：是轉錄和復制的起點。 ② 同時使目的基因能表達和發(fā)揮作用。 c、延伸 （ 70℃ 75℃ ）：在Taq酶 的作用下，合成與模板互補的 ________。 依據：目的基因的有關信息。 非編碼序列： 包括非編碼區(qū)和內含子 原核細胞 真核細胞 不同點 編碼區(qū)是 _____的 編碼區(qū)是間隔的、 _____的 相同點 都由能夠編碼蛋白質的 ______和具有調控作用的 ______區(qū)組成的 原核細胞與真核細胞的基因結構比較 思考 編碼相同數(shù)目氨基酸的蛋白質，原核細胞與真核細胞基因結構一樣長嗎？ 連續(xù) 不連續(xù) 編碼區(qū) 非編碼 目的基因的獲取 基因表達載體的構建 將目的基因導入受體細胞 目的基因的檢測與鑒定 基因工程基本操作的四個步驟 一、目的基因的獲取 (一 )、目的基因主要是 ______________________ 編碼蛋白質的結構基因 請舉出三個以上的例子 （二）、獲取目的基因的常用方法有哪些 ? 從基因文庫中獲取 利用 PCR技術擴增 人工合成 請閱讀 P9第一和二兩段 從基因文庫中獲取目的基因 將含有某種生物不同基因的許多DNA
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