12-基因工程的基本操作程序(存儲(chǔ)版)
【正文】 基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并可進(jìn)行遺傳、表達(dá)和發(fā)揮作用 載體進(jìn)入受體細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)，才能實(shí)現(xiàn)一種生物的基因在另一種生物中的轉(zhuǎn)化。表達(dá)載體在載體基礎(chǔ)上增加了 目的基因、啟動(dòng)子、終止子 三部分結(jié)構(gòu) ② 用到的工具酶： 既用到限制酶切割載體，又用到 DNA連接酶將目的基因和載體拼接，兩種酶作用的化學(xué)鍵都是磷酸二酯鍵 ③ 啟動(dòng)子、終止子 對(duì)于目的基因表達(dá)必不可少 ④ 目的基因不能單獨(dú)進(jìn)入受體細(xì)胞， 必需以表達(dá)載體的方式攜帶進(jìn)去。 （ 2）將重組 DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和 法。 ：能轉(zhuǎn)錄相應(yīng)的信使 RNA，能 編碼蛋白質(zhì) 編碼區(qū) 非編碼區(qū) 原核細(xì)胞的 基因結(jié)構(gòu) ②有調(diào)控遺傳信息表達(dá)的核 苷酸序列，在該序列中， 最重要的是位于編碼區(qū)上 游的 RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)。 在基因操作的基本步驟中 ， 不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的步驟是 （ ） A、 人工合成目的基因 B、 目的基因與運(yùn)載體結(jié)合 C、 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 D、 目的基因的檢測(cè)和表達(dá) C 練習(xí) 知識(shí)點(diǎn)一： 非編碼區(qū) 非編碼區(qū) 編碼區(qū) 編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游 與 RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn) 啟動(dòng)子 終止子 啟動(dòng)子： 位于基因首端一段能與 RNA聚合酶結(jié)合并能起始 mRNA合成的序列。我國(guó)科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。 c、延伸 （ 70℃ 75℃ ）：在 Taq酶的作用下， 合成與模板互補(bǔ)的 ________。 才能確定目的基因是否真正在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳和正確表達(dá)。 注意 三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 （一）轉(zhuǎn)化： （二）方法 將目的基因?qū)? 植物細(xì)胞 將目的基因?qū)? 動(dòng)物細(xì)胞 將目的基因?qū)? 微生物細(xì)胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 基因槍法 花粉管通道法 —— 顯微注射法 —— 感受態(tài)細(xì)胞 目的基因進(jìn)入 _________內(nèi)，并且在 受體細(xì)胞內(nèi)維持 _____和 _____的過(guò)程 受體細(xì)胞 穩(wěn)定 表達(dá) 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法： （ 1） 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 ① 農(nóng)桿菌特點(diǎn)： 易感染雙子葉植物和裸子植物，對(duì)大多數(shù)單子葉植物沒(méi)有感染能力 ②原理： Ti質(zhì)粒上的 TDNA可以轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞染色體的 DNA上。 （ 3）由導(dǎo)入目的基因的水稻細(xì)胞培養(yǎng)成植株需要利用 技術(shù)，該技術(shù)的核心是 和 。 非編碼區(qū) 非編碼區(qū) 編碼區(qū) 編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游 啟動(dòng)子 終止子 編碼區(qū) 非編碼區(qū) 非編碼區(qū) 與 RNA聚合酶
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