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12-基因工程的基本操作程序(存儲版)

2025-03-29 14:57上一頁面

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【正文】 基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并可進行遺傳、表達和發(fā)揮作用 載體進入受體細胞穩(wěn)定表達,才能實現(xiàn)一種生物的基因在另一種生物中的轉化。表達載體在載體基礎上增加了 目的基因、啟動子、終止子 三部分結構 ② 用到的工具酶: 既用到限制酶切割載體,又用到 DNA連接酶將目的基因和載體拼接,兩種酶作用的化學鍵都是磷酸二酯鍵 ③ 啟動子、終止子 對于目的基因表達必不可少 ④ 目的基因不能單獨進入受體細胞, 必需以表達載體的方式攜帶進去。 ( 2)將重組 DNA分子導入水稻受體細胞的常用方法有農桿菌轉化法和 法。 :能轉錄相應的信使 RNA,能 編碼蛋白質 編碼區(qū) 非編碼區(qū) 原核細胞的 基因結構 ②有調控遺傳信息表達的核 苷酸序列,在該序列中, 最重要的是位于編碼區(qū)上 游的 RNA聚合酶結合位點。 在基因操作的基本步驟中 , 不進行堿基互補配對的步驟是 ( ) A、 人工合成目的基因 B、 目的基因與運載體結合 C、 將目的基因導入受體細胞 D、 目的基因的檢測和表達 C 練習 知識點一: 非編碼區(qū) 非編碼區(qū) 編碼區(qū) 編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游 與 RNA聚合酶結合位點 啟動子 終止子 啟動子: 位于基因首端一段能與 RNA聚合酶結合并能起始 mRNA合成的序列。我國科學家應用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。 c、延伸 ( 70℃ 75℃ ):在 Taq酶的作用下, 合成與模板互補的 ________。 才能確定目的基因是否真正在受體細胞中穩(wěn)定遺傳和正確表達。 注意 三、將目的基因導入受體細胞 (一)轉化: (二)方法 將目的基因導入 植物細胞 將目的基因導入 動物細胞 將目的基因導入 微生物細胞 農桿菌轉化法 基因槍法 花粉管通道法 —— 顯微注射法 —— 感受態(tài)細胞 目的基因進入 _________內,并且在 受體細胞內維持 _____和 _____的過程 受體細胞 穩(wěn)定 表達 將目的基因導入植物細胞的方法: ( 1) 農桿菌轉化法 ① 農桿菌特點: 易感染雙子葉植物和裸子植物,對大多數(shù)單子葉植物沒有感染能力 ②原理: Ti質粒上的 TDNA可以轉移到受體細胞,并整合到受體細胞染色體的 DNA上。 ( 3)由導入目的基因的水稻細胞培養(yǎng)成植株需要利用 技術,該技術的核心是 和 。 非編碼區(qū) 非編碼區(qū) 編碼區(qū) 編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游 啟動子 終止子 編碼區(qū) 非編碼區(qū) 非編碼區(qū) 與 RNA聚合酶
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