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基因工程的基本操作程序-預覽頁

2025-01-23 17:54 上一頁面

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【正文】 人們需要的新的生物類型和生物產品 。 分類 : 基因組文庫 部分基因文庫 (如 cDNA文庫 ) 基因組文庫 : 將某種生物體內的 DNA全部提取出來 ,選用適當?shù)?限制酶 ,將 DNA切成 一定范圍大小的 DNA片段 ,然后,將這些 DNA片段 分別與載體連接起來 ,導 入受體菌的群體中儲存, 每個受體菌都含有了一段不同的DNA片段,也就是說,這個群體包含了這種生物的 所有基因 ,叫做這種生物的 基因組文庫 。 原理: 它是利用 DNA雙鏈復制的原理,將基因的核苷酸序列不斷地加以復制,使其數(shù)量呈 指數(shù)方式增長 (約 2n,其中 n為擴增循環(huán)的次數(shù)) 。 (退火) ( 3)將溫度升至 70℃ ~75℃ ,在 耐高溫的 DNA聚合 酶催化 作用下,使 DNA鏈延伸。 標記基因: 是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來。 原理: 當植物受到損傷時,傷口處的細胞會分泌大量的 酚類化合物 ,吸引龍桿菌移向這些細胞,這時龍桿菌的 Ti質粒 上的 TDNA(可轉移的 DNA)可轉移至 受體細胞, 并且整合到 受體細胞染色體的 DNA上 。 ( 3)再將注射了目的基因的受精卵,經 胚 胎早期培養(yǎng)一段時間后 ,再移植到雌 性動物的輸卵管或子宮內,使其發(fā)育 稱為具有 新現(xiàn)狀 的動物。 ( 2)將重組表達載體 DNA分子溶于緩沖液與感受 態(tài)細胞融合,在 一定溫度下 促進感受態(tài)細胞 吸收 DNA分子,完成轉化過程。 受體細胞的 DNA是否 插入了目的基因 方法: DNA分子雜交技術 步驟: ( 1)將轉基因生物的 基因組 DNA提取出來。 ( 2)制備一個含有目的基因的 DNA片段 ,在片 段上用 同位素標記 , 作為探針。 ( 3)使 抗體 與 蛋白質 雜交,如果顯示出 雜交 帶 ,說明目的基因 已經形成蛋白質 。據(jù)以上分析可知,必須使用的酶是 C、限制性
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