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基因工程的基本操作程序-免費閱讀

2025-01-23 17:54 上一頁面

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【正文】 據以上分析可知,必須使用的酶是 C、限制性內切酶。 ( 2)制備一個含有目的基因的 DNA片段 ,在片 段上用 同位素標記 , 作為探針。 ( 2)將重組表達載體 DNA分子溶于緩沖液與感受 態(tài)細胞融合,在 一定溫度下 促進感受態(tài)細胞 吸收 DNA分子,完成轉化過程。 原理: 當植物受到損傷時,傷口處的細胞會分泌大量的 酚類化合物 ,吸引龍桿菌移向這些細胞,這時龍桿菌的 Ti質粒 上的 TDNA(可轉移的 DNA)可轉移至 受體細胞, 并且整合到 受體細胞染色體的 DNA上 。 (退火) ( 3)將溫度升至 70℃ ~75℃ ,在 耐高溫的 DNA聚合 酶催化 作用下,使 DNA鏈延伸。 分類 : 基因組文庫 部分基因文庫 (如 cDNA文庫 ) 基因組文庫 : 將某種生物體內的 DNA全部提取出來 ,選用適當的 限制酶 ,將 DNA切成 一定范圍大小的 DNA片段 ,然后,將這些 DNA片段 分別與載體連接起來 ,導 入受體菌的群體中儲存, 每個受體菌都含有了一段不同的DNA片段,也就是說,這個群體包含了這種生物的 所有基因 ,叫做這種生物的 基因組文庫 。 cDNA文庫 如果用某種生物發(fā)育的某個時期的 mRNA反轉錄產生的多種互補 DNA(也叫 cDNA)片段 ,與載體連接后儲存在 一個受體菌群中 ,那么,這個受體菌群就叫做這種生物的 cDNA文庫 。 (延伸) 利用 PCR技術擴增目的基因 PCR擴增儀 人工合成 目的基因 基因較小,核苷酸序列已知,可以利用 DNA合成儀人工合成 . 二、 基因 表達載體 的構建 基因表達載體 的模式圖 抗生素 抗性 基因 將生物的所有 DNA直接導入受體細胞不是更簡便嗎? 表達載體的構建使目的基因在受體細胞中 穩(wěn)定存在,并且以遺傳給下一代 ,同時是目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。 轉化過程 基因
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