專題1基因工程12基因工程的基本操作程序修改-文庫(kù)吧資料
2024-09-24 20:28本頁(yè)面
【正文】 是受精卵？ 顯微 注射 分裂 分化 移 植 發(fā)育 將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞 ① 原核生物特點(diǎn)：繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)少 ② 方法： 用 Ca2+處理細(xì)胞 感受態(tài)細(xì)胞 表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合 感受態(tài)細(xì)胞吸收 DNA分子 四、目的基因的檢測(cè)與鑒定 —— 檢查是否成功 (檢查是否成功 ) 分子水平檢測(cè) 個(gè)體水平鑒定： ① 檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因 ② 檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA ③ 檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等 DNA分子雜交 DNA分子雜交 抗原 抗體雜交 目的基因的檢測(cè)與鑒定 1. 檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的 DNA上是否插入了目的基因 提取受體生 物全部 DNA 適當(dāng)限制 酶切割 DNA片段 與同位素標(biāo)記的含 目的基因片段基因探針雜交 （表明目的基因已插入） 顯出雜交帶 提取受體生 物全部 適當(dāng)限制 酶切割 與同位素標(biāo)記的含目的基因片段基因探針雜交顯出雜交帶（表明目的基因已插入）提取受體生物全部適當(dāng)限制酶切割與同位素標(biāo)記的含目的基因片段基因探針雜交顯出雜交帶（表明目的基因已插入）提取受體生物全部適當(dāng)限制酶切割與同位素標(biāo)記的含目的基因片段基因探針雜交顯出雜交帶2. 檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA 用同位素標(biāo)記的 目的基因片段雜交 顯出雜交帶 （表明目的基因已轉(zhuǎn)錄出了 mRNA） 檢測(cè) DNA利用的是 DNA與 DNA雜交，檢測(cè) mRNA利用的是 DNA與 mRNA雜交。 鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。 （二）構(gòu)建零件及其作用 ① 目的基因 ② 啟動(dòng)子 基因表達(dá)載體的組成 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的一段特殊結(jié)構(gòu)的 DNA片段，位于基因的首端， RNA聚合酶與之結(jié)合才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，進(jìn)而獲得需要的蛋白質(zhì)。 (基因工程的核心 ) ③ 將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的 _____處，再加入適量 __________，形成了一個(gè)重組 DNA分子 (重組質(zhì)粒 )。 氫鍵 單鏈 DNA 雙鏈 DNA DNA鏈 d、變性、退火、延伸、多次重復(fù) ② 用 __________切割目的基因，使其產(chǎn)生 。 非編碼序列： 包括非編碼區(qū)和內(nèi)含子 原核細(xì)胞 真核細(xì)胞 不同點(diǎn) 編碼區(qū)是 _____的 編碼區(qū)是間隔的、 _____的 相同點(diǎn) 都由能夠編碼蛋白質(zhì)的 ______和具有調(diào)控作用的 ______區(qū)組成的 原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)比較 思考 編碼相同數(shù)目氨基酸的蛋白質(zhì)，原核細(xì)胞與真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)一樣長(zhǎng)嗎？ 連續(xù) 不連續(xù) 編碼區(qū) 非編碼 ① 概念 ： PCR全稱為 _______________，是一項(xiàng) 在生物 ____
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