(自創(chuàng))基因工程的基本操作程序-閱讀頁
2025-03-10 14:33本頁面
【正文】 中插入 終止子 (抗蟲基因末端 )，導(dǎo)入棉花受精卵，結(jié)果成長的植株，有了抗蟲能力。為什么要構(gòu)建基因表達(dá)載體呢？ 目的：所需物質(zhì)：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。③ 轉(zhuǎn)化過程 :Ti質(zhì)粒目的基因構(gòu)建表達(dá)載體導(dǎo)入 植物細(xì)胞插入 植物細(xì)胞染色體 DNA表達(dá) 新性狀轉(zhuǎn)入 農(nóng)桿菌 基因槍法又稱微彈轟擊法，是 利用壓縮氣體產(chǎn)生的動(dòng)力 ，將包裹在金屬顆粒表面的表達(dá)載體 DNA打入受體細(xì)胞中 ，使目的基因與其整合并表達(dá)的方法。花粉管通道法就是在植物受粉后， 花粉形成的花粉管還未 愈合前 ， 剪去 柱頭，然后， 滴加 DNA（含目的基因），使目的基因借助花粉管通道進(jìn)入受體細(xì)胞。（一）檢測基因探針基因探針 ： 是一段帶有檢測標(biāo)記，且序列已知的，是一段帶有檢測標(biāo)記，且序列已知的，與目的基因互補(bǔ)的核酸序列?！ ? 基因探針通過基因探針通過 分子雜交分子雜交 與目的基因結(jié)合，產(chǎn)生雜與目的基因結(jié)合，產(chǎn)生雜交信號(hào)，能從浩翰的基因組中把目的基因顯示出來。 DNA分子雜交示意圖分子雜交示意圖 采用一定的技術(shù)手段，將兩種生物的 DNA分子的單鏈放在一起，如果這兩個(gè)單鏈具有互補(bǔ)的堿基序列，那么，互補(bǔ)的堿基序列就會(huì)結(jié)合在一起，形成 雜合雙鏈區(qū) ；在沒有互補(bǔ)堿基序列的部位，仍然是 兩條游離的單鏈 。提取（（ 3）檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)）檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)方法方法 ———— 抗原抗原 抗體雜交抗體雜交蘇云金桿菌Bt毒素蛋白將 Bt毒蛋白注射小鼠體內(nèi)從小鼠血管抽出血液分離出抗 Bt毒素的抗體抗體蛋白質(zhì) 出現(xiàn)雜交帶脫分化組織培養(yǎng)若不能表達(dá)，若不能表達(dá)，要對(duì)抗蟲基因要對(duì)抗蟲基因再進(jìn)行再進(jìn)行 修飾修飾 。v目的基因的表達(dá)和檢測目的基因的表達(dá)和檢測提示： ① DNA分子雜交技術(shù)首先提取受體細(xì)胞中的 DNA，然后高溫解聚成單鏈，再與同位素標(biāo)記的 DNA探針雜交； ② 抗原－抗體雜交所用到的抗體是用表達(dá)出的蛋白質(zhì)注射動(dòng)物進(jìn)行免疫，產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，并提取出而來的
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